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川芎阿魏酸hplc检测方法
来源: | 作者:上海优选生物 | 发布时间: 2024-05-09 | 16 次浏览 | 分享到:

阿魏酸是一种有机物,它是从植物中提取出来的。其中,在阿魏、当归、川芎、升麻、酸枣仁等中药材种含量比较高。因此,现在就考虑从川芎中提取并检测其含量。阿魏酸具有很强的抗氧化活性,抗辐射能力。就检测方法来说,这里说的是高效液相色谱(HPLC)法。检测植物体内的有机物含量,HPLC法是常用的。



检测原理:通过对样品进行处理,比如水浴蒸干,加甲醇热回流,过滤,残渣加水溶解,稀盐酸调pH=1-2,煮沸,用乙醚提取,残渣用甲醇溶解,过滤。将获得的提取液,进入HPLC内进行色谱分离(C18色谱柱,流动相甲醇:1%乙酸水= 28:72),用紫外检测器获取信号值,在波长323nm的地方就可以测定阿魏酸的吸收值。根据测定的标准曲线,计算出样品中的阿魏酸含量。



标准品检测:先对阿魏酸的标准品进行稀释,精确称量30mg阿魏酸标准品,放在50ml的容量瓶中,加入甲醇溶解并定容至刻度,混匀。然后,精密吸取5mL置于50ml的容量瓶中,加入甲醇至刻度,混匀,得到对照品的溶液使用。精密吸取这个标准品溶液2、8、12、16、20μL注入高效液相色谱仪,用紫外吸收检测器,于波长323nm处测定阿魏酸的峰高和峰面积值,以进样量对峰面积绘制标准曲线,进行线性回归,得到回归方程。


样品检测:用移液器吸取10ul的样品溶液,注入到HPLC内,还是用波长为323nm的紫外检测器,测定阿魏酸的峰值和峰面积。根据标准曲线,计算出阿魏酸的含量。


注意事项:评估方法,做精密度、稳定性和重复性试验。


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