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植物丙二醛检测方法
来源: | 作者:上海优选生物 | 发布时间: 2024-04-22 | 287 次浏览 | 分享到:

植物组织中,丙二醛的含量不仅反映了植物体内氧化应激水平和抗氧化能力,还能进一步了解植物的生长发育机制,在科研方面具有重大的意义。当植物在生长的过程中,随着环境的变化,器官开始衰老,植物组织的氧化作用就开始了。丙二醛就是氧化作用的产物,它可以和蛋白质反应,改变蛋白质大分子结构,从而让蛋白质丧失功能或抑制蛋白质的合成。因此,丙二醛对细胞是有一定伤害作用的,通过检测丙二醛的含量,间接的说明植物被氧化的程度。



如何检测植物组织丙二醛的含量呢?在酸性和高温的条件下,丙二醛能够和硫代巴比妥酸(MBA)发生反应,生产红棕色三甲基复合物。通过这个反应特征,可以通过分光光度法进行检测。在检测行业,也有用到液相或气相色谱的技术,对植物组织中的丙二醛测定。还可以通过酶联免疫(ELISA)法,试剂盒的方式让检测变得更简单高效。


要检测植物中丙二醛的含量,需要先对它进行提取。称取干旱、高温等环境条件的植物叶片,加入石英砂和三氯乙酸,研磨均匀。将研磨好的浆液,在离心机的作用下离心(4000r/min,10min),吸取上清液作为丙二醛的提取液备用。取3个样品试管做重复,加入提取液,对照管是用蒸馏水,都分别加2mL。然后各个试管内,都加入2mL的0.6%硫代巴比妥酸,在沸水浴中反应15min,冷却后离心。取上清液分别在532nm、600nm、450nm的波长下检测吸光度值。



植物组织中的糖类物质对MDA-TBA反应有干扰的作用,为了消除这样的干扰,可以通过公式C=6.45(A532-A600)-0.56A450,计算出来样品提取液中的MDA的含量。再计算出植物组织中丙二醛的含量,公式如下:


MDA含量(umol/g)=MDA浓度(umol/L)x提取液体积(mL)/样品重量(g)x1000


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