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植物总酚含量检测方法
来源: | 作者:上海优选生物 | 发布时间: 2024-04-18 | 7 次浏览 | 分享到:

植物体内含有丰富的酚类物质,这些物质能够清除体内的自由基,抵抗氧化的进行,防止衰老的发生。不管是在食品,还是在化妆品、医药行业,都具有比较广泛的应用价值。检测植物中的总酚物质,可以通过分光光度法来完成。



在碱性的条件下,植物中的多酚具有还原性,可以将钨钼酸变成蓝色。根据反应程度的不同,颜色也有深浅的变化。根据颜色的变化和深浅,可以通过分光光度计的方法,在760nm处测定特定的吸光值。通过标准曲线的方法,计算出样品中的酚类物质含量。


首先要准备实验试剂,分别为标准品,钨酸钠,磷钼酸,85%的磷酸,Na2CO3,蒸馏水。


其次,配置福林试剂和Na2CO3溶液,参考标准方法。


样品处理,这一步是比较关键的。如果处理不恰当,看起来是检测出来的,未必是真实反应样品酚类含量的。称取一定量的样品,加入95%的乙醇,60℃温浴振荡2h,25℃x12000rpm,离心10min,取上清液并用95%的乙醇定容到3mL,待测。



现在,比较关键的步骤就是制作标准曲线了。精密称量的标准品,一般可以用没食子酸。用蒸馏水来定容,做7个点的浓度梯度,放在棕色的容量瓶中,加蒸馏水来定容。然后,分别加入制作好的福林试剂,混匀后加入20%的碳酸钠溶液,混合后,30℃避光防止0.5h,以不加标准品的蒸馏水作为空白对照,在760nm的波长下分别测定它们的吸光值。也可以分别测3次,求取平均值。另外,以各自已知的浓度为横坐标,以对应浓度的吸光值为纵坐标,绘制标准曲线。


最后,依照标准品检测的方法,处理样品提取溶液,在760nm的波长下测定吸光值。根据标准曲线,计算出总酚的含量。


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