视黄醇是维生素A的形式之一，是维生素A的衍生物，它主要来自猪肝、胡萝卜、苹果、芒果等。视黄醇的化学式为C20H30O，分子量为286.45，是一种脂溶性的维生素，具有酯环结构，含有5个共轭双键。化学性质活泼，如氧气、阳光等因素，很容易被氧化分解或异构化。视黄醇可溶于甲醇、氯仿、醚等有机溶剂，几乎不溶于水或甘油。它可促进生成胶原蛋白，加速角质代谢，调节细胞分化等，常用于护肤和医学等领域。

检测样本中视黄醇的含量，实验室一般采用高效液相色谱（HPLC）、液相串联质谱（LC-MS/MS）、酶联免疫吸附（ELISA）法、分光光度法等。这里以HPLC为例，简单的介绍一下检测的流程。

1.样本前处理

假如是血清的样本，可取0.5ml的血清，加入1ml的乙腈，振荡混匀60s，在12000rpm的离心机中旋转15min。取上清液，加入2ml的正己烷萃取，转移有机相，使用氮吹干。再加入100uL的甲醇复溶，待测。

2.色谱条件

如果要测的是视黄醇的单体含量，可用甲醇和水（85:15）为流动相，等度洗脱，或者采用乙腈和四氢呋喃，梯度洗脱。使用常规的反相色谱柱C18，250mm长，4.6mm内径，5um粒径。柱温的话，不能随意设置的，一般在30-40℃，温度波动不要太大，否则会影响到出峰或基线的稳定性。一般的流速可设置为1ml/min，进样量10-20uL。紫外检测器，波长325-340nm。根据样本的复杂程度进行调整。

3.标准曲线

将视黄醇的标准品通过甲醇溶解，定容到一定体积，配制成标准母液。梯度稀释5-7个浓度点，这个稀释的倍数是根据样本的浓度来确定的。确保标准溶液稀释的范围能够覆盖到样本浓度的可能范围，确定一下检测限。依次进样到HPLC中，记录色谱峰的保留时间，对色谱峰面积进行积分，拟合出标准曲线，得到回归方程，相关系数1≥R²≥0.999，回收率>90%，RSD符合要求。

4.含量测定

样本进样到HPLC中，根据保留时间，找到视黄醇的色谱峰。对色谱峰面积进行积分，因为色谱条件是不变的，可以代入到回归方程，计算出样本溶液中的视黄醇含量。