环磷酸鸟苷（简称cGMP）是细胞内的第二信使分子，主要通过激活蛋白激酶G调控多种生理功能。它是由鸟苷三磷酸（GTP）经过鸟苷酸环化酶（GC）催化生成，并经过磷酸二酯酶（PED）分解。主要功能包括信号传导和生理调节，血管舒张，视觉传导，心血管系统保护，神经和代谢条件，细胞增殖和凋亡等。在植物体内，cGMP调节植物体内的能量转化过程。

通常的情况下，使用高效液相色谱（HPLC）测定样本中的cGMP的含量。简单的介绍一下HPLC测定的流程，如下所示。

1.样品前处理

精确称取0.2g试样于 2mL 离心管，加入 1mL 2.5%高氯酸水溶液，放置振荡器振荡1min，低温超声 20min，13000r/min 离心 20min，上清液过0.45μm滤膜，待测。

2.色谱条件（仅供参考）

检测器：VWD，波长：259nm。色谱柱：TSKgel ODS-100V（250*4.6mm;5μm ）柱温：25℃ 。 流动相：0.035mol/L 磷酸二氢钠（pH=6.8）等度洗脱，流速：1ml/min。 进样量：10μL。

3.标准曲线

称取cGMP的标准瓶，溶解配制成一定浓度的标准母液。梯度稀释6个浓度点，尽可能的覆盖到样本溶液可能的范围。可以通过信噪比找到定量限，也可以查询相关的文献资料，看到最高的浓度范围。这样，就知道每次要稀释多少倍了。依次进样到HPLC中，测出色谱峰，记录保留时间。对6个色谱峰分别进行积分，结合它的标准溶液浓度，可以拟合出标准曲线，得到回归方程。

4.含量计算

将样品溶液进到HPLC中，根据出峰情况进行调整。通过保留时间，可识别出cGMP的色谱峰。对这个样品的色谱峰面积进行积分，代入到回归方程，可计算出样品溶液中的cGMP含量。