天冬酰胺主要来源于植物，比如羽扇豆、大豆以及豆芽的水提取物中。通过氨基酸的酰胺反应，也可以通过人工的方式合成天冬酰胺。L-天冬酰胺是一种天然存在的化合物，化学式为C4H8N2O3，分子量为132.12，是生物体内常见的20种氨基酸之一。天冬酰胺是由4个碳原子组成的，侧链为酰胺基，和天冬氨酸相比少一个羧基（COOH）。它是蛋白质的基本组成单元之一，稳定蛋白质的结构，参与氮代谢和能量供应，是神经递质的前体，可提高免疫细胞活性，具有抗氧化等作用。

检测样品中的天冬酰胺含量的方法，一般包括高效液相色谱（HPLC），液相质谱联用（LC-MS），酶联免疫吸附（ELISA）法等。这里以HPLC为例，简单的介绍一下检测流程。

1.样品处理

这个步骤包括了水解和衍生两个过程。水解就是将样品中的目标化合物溶解到溶剂中，比如称取0.1g的样本，加入1ml的6mol/L的盐酸，振荡5min。之后，放到105℃的烘箱中水解24h。水解结束后，冷却到室温，用盐酸补充丢失的部分。加入1ml的6mol/L的NaOH溶液，振荡5min中和到中性，在4000r/min的离心10min，取0.5ml出来进行衍生。

衍生的过程，就是将取出来的0.5ml的样本溶液，加入pH=9.0 碳酸氢钠缓冲溶液和DNFB各0.5ml，放入60±0.5℃水浴中，避光反应60min。取出立即用冷水冷却至室温，加入3.5ml pH=7.0磷酸缓冲溶液，充分混匀，室温避光反应15min，取上清液过0.22μm 滤膜，待液相色谱测定。 

2.色谱条件

用C18的色谱柱，250mm长，4.6mm内径，5um的粒径；柱温设置为38℃。用VWD检测器，波长360nm。以A:乙腈:甲醇=90:10  B:0.02mol/L磷酸二氢钠+磷酸氢二钠为流动相，梯度洗脱。流速1ml/min，进样量10uL。

3.标准曲线

称取少量的标准品，溶于甲醇中，制备成一定浓度的标准母液。梯度稀释6个浓度点，并进样到HPLC中，测出各个浓度的色谱峰。对峰的面积进行积分，结合它的浓度，在表格中可以拟合出标准曲线，得到回归方程。相关系数r2要大于0.999，并接近于1。重复性RSD≤2%，有的时候要考虑回收率。

4.含量计算

将样品溶液进到HPLC，根据标准品的保留时间，找到目标化合物的峰。对色谱峰面积进行积分，代入到回归方程，就可以计算出样品溶液中的天冬酰胺的含量。