维生素D是一种脂溶性的维生素，主要有D2（麦角钙化醇）和D3（胆钙化醇）两种形式，它们的结构很相似，只是侧链有差别。维生素D是一种环戊烷多氢菲类化合物，可促进小肠黏膜细胞对钙和磷的吸收，促进钙盐的更新和新骨的生成，调节细胞生长分化和免疫功能。维生素D主要通过阳光照射和食物摄取等方法获得，其中紫外线B可激活皮肤中的胆固醇转化为维生素D。植物中的维生素D含量比较低，而大多数是存在海鲜类、奶类、动物肝脏、鸡蛋等食物中。

检测方法：高效液相色谱（HPLC）或液相色谱质谱（LC-MS）。以HPLC为例，简单的介绍一下检测流程和方法。如果要测的话，需要咨询有经验的老师或查阅权威的文献资料。

1.样品提取

称取样品2g放到5ml棕色离心管内，加入2ml乙醇。匀浆200s，转移到50ml棕色离心管，再加入皂化试剂，充分振荡1min。在85℃的水浴中避光30min，反应结束后取出来放冷到室温。弄出来后，加入15ml的石油醚试剂，混合1min，静置15min。重新萃取2次，合并到一起。用水洗涤到中性，加入1g的无水硫酸钠，取上清液，室温吹干。加0.5ml的乙醇溶解，0.22um膜过滤，待测。

2.色谱条件

可以用VWD或DAD的检测器，波长设置为265nm。C18的色谱柱，250mm长，4.6mm内径，5um粒径。柱温的话，一般设置为30℃差不多了。就考虑流动相了，流动相用100%的甲醇，等度洗脱，相对比较简单，但是要脱气或色谱级别的。流速为1ml/min，进样量10-20uL，根据实际的出峰情况进行调整。

3.标准曲线

称取维生素D的标准品于5mL棕色容量瓶中，然后加入适量甲醇超声溶解，用甲醇定容至刻度线，摇匀、使之成为1mg/mL的储备液。稀释成200ug/mL，100ug/mL，50ug/mL，20ug/mL，10ug/mL，2ug/mL的梯度浓度。依次进样到HPLC，记录出峰的保留时间，对各个峰的峰面积进行积分处理，对应到峰的标准溶液浓度，拟合出标准曲线，得到回归方程。

4.含量计算

将样品溶液进到HPLC中，或自动进样，或手动进样，看出峰的情况。根据保留时间，可以识别出样品维生素D的色谱峰，对峰面积进行积分，并代入到回归方程，就可计算出样品溶液中的维生素D含量。