维生素K1是一种脂溶性的维生素，多环芳香酮。维生素K1主要是从天然的绿色植物中提取出来的，比如菠菜、羽衣甘蓝等。它不溶于水，但可溶于氯仿、乙醚、植物油、乙醇等有机溶剂，对光敏感，最佳储存温度为2-8℃。维生素K1主要用在科学研究或工业方面，药理方面主要涉及血液凝固和骨骼健康等。

检测样本中维生素K1含量的方法，主要有高效液相色谱（HPLC）、液相色谱串联质谱（LC-MS/MS）等。以HPLC为例，简单的介绍一下检测流程。具体的要参考相关的标准、药典或文献资料。

1.样品提取

皂化：精确称取样品 2g置于5m棕色离心管内，加入2mL乙醇，匀浆 。转移到50mL棕色离心管，再加入抗坏血酸1g、BHT0.1g、加入 8mL乙醇，50%氢氧化钾 20mL，然后充分振荡混匀1min。置于85℃水浴中避光皂化30min。反应结束后，取出用冷水冷却至室温。                

萃取：在上述皂化好的反应液中加入15mL石油醚，充分混合振荡1min，静置15min。将石油醚层转移另一个50mL棕色离心管内。重复萃取两次。然后合并三次萃取液。用水洗涤至中性，加入1g无水硫酸钠，取上清液，室温氮气吹干。加入0.5mL色谱级乙醇复溶，过0.22μm滤膜,立刻上机测定。

2.色谱条件

C18的色谱柱，250mm长，5.6mm内径，5um粒径，柱温30℃。流动相可以用100%甲醇，等度洗脱，流速设置为1ml/min。VWD或紫外检测器，波长254nm。进样量10-20uL，仅供参考，以实际情况进行调整。

3.标准曲线

精密称取一定量各个标准品于5mL棕色容量瓶中，然后加入适量甲醇超声溶解后用甲醇定容至刻度线，摇匀、使之成为1mg/mL的单标储备液，-20℃保存。梯度稀释6个浓度点，成倍的稀释，比如2倍或5倍等，尽可能的覆盖到样本溶液的浓度范围。这里需要考虑到检测限或定量限，以信噪比的倍数作为参考。记录6个浓度的数值，并依次进样到HPLC中，判断出峰的情况。记录色谱峰的保留时间，对峰面积进行积分处理。根据对应的浓度值，拟合出标准曲线，得到回归方程。

4.含量计算

将样本溶液进样到HPLC中，出峰的情况可能比标准品复杂一些。样本溶液中的物质以及它们的性质是不确定的，有时候用过的色谱柱，也会出现污染或堵塞等情况。根据保留时间，可以找到样品的维生素k1的色谱峰，对它的面积进行积分处理。并代入到回归方程，可以计算出样品溶液中的维生素k1的含量。