维生素K12是一种脂溶性的维生素，具有叶绿醌生物活性的萘醌基团的衍生物，是人体必需的维生素之一，来源于动物肝脏、蛋类、绿叶蔬菜等。维生素K12是一系列萜烯侧链化合物的统称，以异戊二烯为结构单元，根据侧链碳原子数的不同，可分为K2(10)、K2(20)、K2(35)、K2(40)等。维生素K2的作用主要是预防骨质疏松，促进凝血酶原的形成，具有利尿，强化肝脏的解毒功能。

实验室检测方法，包括高效液相色谱（HPLC），气相色谱（GC），气质联用（GC-MS），酶联免疫吸附（ELISA）法等。以HPLC为例，简单的介绍一下操作流程，可参考GB 5009.290-2023的具体方法。

1.样品处理

精密称取试样20mg放入到10ml的容量瓶中，加入异丙醇超声30min，用异丙醇定容到刻度，摇匀，0.45um膜过滤，待测。

2.色谱条件

C18色谱柱，150mm长，4.6mm内径，5um粒径，柱温50℃，也有用25℃，根据实验情况来定。以甲醇为流动相，也有用正己烷和异丙醇的，等度洗脱，流速1ml/min。紫外检测器，波长254nm；进样量10ul，根据样本浓度和杂质程度调整。

3.标准曲线

举例，以四烯甲奈醌（MK-4）为标准品，配制成2g/L的维生素K2标准溶液，在进行梯度稀释，比如20-200mg/L的6个浓度点。以上述的色谱条件，进样HPLC，测出各个浓度的色谱峰，记录峰的保留时间和峰面积。对峰面积进行积分，对应到标准溶液浓度，可绘制出标准曲线，得的回归方程，相关系数r2大于0.999。可考虑加标回收率，重复性等方法学。

4.含量计算

将样品溶液进样到HPLC，和标准曲线的色谱条件相同，根据测出色谱峰的保留时间，识别出目标化合物。对样品色谱峰面积进行积分，代入到回归方程，计算出维生素K2的含量。