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HPLC法测定香豆酸的含量
来源: | 作者:上海优选生物 | 发布时间: 2025-04-29 | 4 次浏览 | 分享到:
香豆酸是一种内酯类化合物,主要分布在禾科植物的茎秆中和豆科植物中,比如苹果,葡萄,柚子,茄子,胡萝卜,青椒,小麦,大麦,玉米,花生,核桃,杏仁,大豆等。它的化学式为C6H4O4,分子量为140.9,微溶于冷水,苯和氯仿,易溶于热水,甲醇,乙醇等,不溶于二氯甲烷和石油醚。在科研过程中,香豆酸具有广泛的药理作用,如抗氧化,抗炎,免疫调节,保护神经等作用,被广泛的用在医药,食品,日用品和饲料等领域。

香豆酸是一种内酯类化合物,主要分布在禾科植物的茎秆中和豆科植物中,比如苹果,葡萄,柚子,茄子,胡萝卜,青椒,小麦,大麦,玉米,花生,核桃,杏仁,大豆等。它的化学式为C6H4O4,分子量为140.9,微溶于冷水,苯和氯仿,易溶于热水,甲醇,乙醇等,不溶于二氯甲烷和石油醚。在科研过程中,香豆酸具有广泛的药理作用,如抗氧化,抗炎,免疫调节,保护神经等作用,被广泛的用在医药,食品,日用品和饲料等领域。



检测方法:高效液相色谱(HPLC)。


1.样品处理


将含有香豆酸的样本进行粉碎,过筛,并加入适量的甲醇进行溶解。超声波处理,让样本中的香豆酸充分溶解到甲醇中,并通过0.22um的微孔膜过滤。



2.色谱条件


C18色谱柱,250mm长,4.6mm内径,5um粒径;柱温30℃。以0.1%甲酸水为流动相A,甲醇为流动相B,梯度洗脱,流速1ml/min。紫外检测器,波长320nm,进样量10uL。



3.标准曲线


将香豆酸的标准品进行溶解,可以用有机溶剂如甲醇,制成1mg/mL的标准溶液。进行梯度稀释6个浓度,并记录各个浓度值。依次上机测定色谱峰,对色谱峰面积进行积分。以浓度为横坐标,色谱峰面积为纵坐标,在表格中的函数公式绘制出标准曲线,得到回归方程,相关吸收r2一般要大于0.999。


4.样品测定和计算


将制备好的样本溶液也进样到HPLC中,根据色谱峰的保留时间位置,可以获得目标色谱峰。对色谱峰面积进行手工或自动的积分,代入回归方程,可以计算出样品中的香豆酸含量。


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