柴胡皂苷a来源于北柴胡的干燥根,化学式为C42H68O13,分子量为780.982,它易溶于水、稀醇,不溶于苯、乙醚、氯仿等。研究表明,柴胡皂苷a具有多种生物活性,比如抗炎、抗病毒、抗癌、降血脂、保护肝脏等。它属于β-香树脂烷型五环三萜类化合物,苷元是齐墩果烷型,包括多个糖基和1个母核,也是一种天然的皂苷类化合物。药理作用包括,通过抑制NF-κB通路减少炎症因子(如TNF-α、IL-6)释放,抑制TGF-β1的表达,保守神经等。
柴胡皂苷a来源于北柴胡的干燥根,化学式为C42H68O13,分子量为780.982,它易溶于水、稀醇,不溶于苯、乙醚、氯仿等。研究表明,柴胡皂苷a具有多种生物活性,比如抗炎、抗病毒、抗癌、降血脂、保护肝脏等。它属于β-香树脂烷型五环三萜类化合物,苷元是齐墩果烷型,包括多个糖基和1个母核,也是一种天然的皂苷类化合物。药理作用包括,通过抑制NF-κB通路减少炎症因子(如TNF-α、IL-6)释放,抑制TGF-β1的表达,保守神经等。
实验室检测柴胡皂苷a的含量,主要采用高效液相色谱(HPLC),参考中国药典的方法。
1.样品处理
将样本进行粉碎处理,过4号筛,精密称取0.5g,放在具塞锥形瓶中。加入5%的浓氨的甲醇溶液25ml,塞好塞子。在30℃的水浴中超声(功率200W,频率40kHz)处理30min,过滤。用甲醇20ml分2次洗涤容器和药渣,将滤液合并,蒸干溶剂。残渣用甲醇进行溶解,转移到5ml容量瓶中,用甲醇定容到刻度,摇匀,过滤,待测。
2.色谱条件
C18色谱柱,250mm长,4.6mm内径,5um粒径;柱温30℃。以乙腈为流动相A,超纯水为流动相B,梯度洗脱,流速1ml/min。紫外检测器,波长210nm,进样量10-20uL。
3.标准曲线
精密称量柴胡皂苷a的标准品,制成0.4mg/mL的溶液。并进行梯度稀释6个浓度点,确保低点的浓度在检测限的有效范围内,并记录各个标准溶液浓度值。依次进样到HPLC,测出各个色谱峰,记录色谱峰的保留时间,对色谱峰面积进行积分,对应到标准溶液的浓度,可以绘制出标准曲线,得到回归方程,相关系数r2>0.999。
4.含量计算
将制备好的样品溶液,进样到HPLC,和标准曲线实验相同的色谱条件。通过保留时间,可以识别出目标色谱峰。对色谱峰面积进行积分,代入到回归方程,可以计算出样品中的柴胡皂苷a的含量。