木犀草素是从金银花、野菊花等植物中提取出来的一种天然的黄酮类化合物,它具有多种药理活性,比如抗炎,抗过敏,抗菌,抗病毒等。木犀草素在自然界中多以糖苷的形式存在,具有C6-C3-C6 碳骨架的苯并-γ-吡喃酮结构。化学式为C15H10O6,分子量是286.24,微溶于水,具弱酸性,可溶于碱性溶液中。木犀草素能够与铁、镁、钙、铜、铝、锆等金属离子生成带色的络合物。主要存在于金银花、菊花、荆芥、白毛夏枯草、洋蓟、紫苏属、黄芩属、裸花紫珠等天然药材中。
木犀草素是从金银花、野菊花等植物中提取出来的一种天然的黄酮类化合物,它具有多种药理活性,比如抗炎,抗过敏,抗菌,抗病毒等。木犀草素在自然界中多以糖苷的形式存在,具有C6-C3-C6 碳骨架的苯并-γ-吡喃酮结构。化学式为C15H10O6,分子量是286.24,微溶于水,具弱酸性,可溶于碱性溶液中。木犀草素能够与铁、镁、钙、铜、铝、锆等金属离子生成带色的络合物。主要存在于金银花、菊花、荆芥、白毛夏枯草、洋蓟、紫苏属、黄芩属、裸花紫珠等天然药材中。
药用植物中木犀草素含量的测定方法,一般采用高效液相色谱(HPLC)或液相色谱质谱联用(LC-MS)。
1.样品提取
将样品进行粉碎,过二号筛,精确称量2g,放置于锥形瓶中,加入85%的甲醇溶液25ml。加热回流1.5h放冷称量,用85%甲醇补充减少的重量,摇匀过滤待测。
2.色谱条件
使用C18色谱柱,250mmx4.6mm,5um;柱温:室温。流动相为甲醇-0.5%冰醋酸溶液(50:50),或甲醇为流动相A,0.05%磷酸溶液为流动相B,梯度洗脱,流速1.0ml/min;紫外检测器,波长350nm,进样量5-10uL;理论塔板数不低于5000。
3.标准曲线
称取木犀草素的标准品若干克,加入甲醇制成70ug/ml的溶液。然后,进行成倍的梯度稀释5-7个点,一般是用6个。稀释的最低浓度点要在检测限的范围内,确保线性的准确性。将标准溶液依次进样到HPLC中,测出对应的色谱峰。由于这个标准溶液是相对纯净的,可以获得有效的色谱峰保留时间。通过这个保留时间的位置,就可以去寻找样品的目标色谱峰。对色谱峰面积进行积分,并结合对应的溶液浓度,绘制出标准曲线,得到回归方程,相关系数r2>0.999。
4.样品测定和计算
根据测出来样品的色谱峰,对它进行手动或自动积分,代入到回归方程,是可以计算出样品的木犀草素含量。