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甜菜色素含量检测方法
来源: | 作者:上海优选生物 | 发布时间: 2025-04-23 | 19 次浏览 | 分享到:
甜菜色素是从植物甜菜中提取出来的一种天然色素,由甜菜红素和甜菜黄素组成,甜菜红素的主要成分是甜菜红苷。易溶于水,难溶于醋酸、丙二醇,不溶于乙醇、甘油、油脂。甜菜红苷的较大吸收波长为538nm。甜菜色素易溶于水,在pH4.0-7.0范围内呈红紫色;pH小于4.0或大于7.0时,溶液颜色由红变紫;pH超过10.0时,溶液会变黄,甜菜红素会转变成甜菜黄素。可广泛的用在食品,饮料,医药和化妆品等领域。

甜菜色素是从植物甜菜中提取出来的一种天然色素,由甜菜红素和甜菜黄素组成,甜菜红素的主要成分是甜菜红苷。易溶于水,难溶于醋酸、丙二醇,不溶于乙醇、甘油、油脂。甜菜红苷的较大吸收波长为538nm。甜菜色素易溶于水,在pH4.0-7.0范围内呈红紫色;pH小于4.0或大于7.0时,溶液颜色由红变紫;pH超过10.0时,溶液会变黄,甜菜红素会转变成甜菜黄素。可广泛的用在食品,饮料,医药和化妆品等领域。


检测样品中的甜菜色素含量,实验室常用高效液相色谱(HPLC)法,液相色谱质谱联用(LC-MS)法,分光光度法等。以HPLC为例,简单的介绍一下检测流程,仅供参考,如需检测可以咨询专业的检测结构或权威文献资料。


1.样品处理


用乙醇浸提法进行甜菜红素的提取。先将新鲜的甜菜根清洗干净,切成一个一个的小块,粉碎,加入乙醇溶液浸泡,再进行搅拌,过滤。让甜菜色素充分的溶解到乙醇中,然后用旋转蒸发器将溶液中的乙醇都蒸发干净,就得到了甜菜色素粗提物了。通过层析过滤的方法,将色素和其他杂质分离出来,待测。提取过程中,要注意温度,pH值,提取时间等细节。



2.色谱条件


C18色谱柱,250mmx4.6mm,5um;柱温:室温。流动相:A甲醇:B2%冰醋酸缓冲液(20:80),流速1ml/min。二极管阵列检测器或紫外检测器,波长538nm,进样量10-20uL。



3.标准曲线


用甜菜红色素的标准品,用甲醇溶液溶解,梯度稀释6个浓度点,在HPLC测出对应的色谱峰。对各个峰面积进行积分,对应标准溶液的浓度,绘制出标准曲线,得到回归方程,确保在有效的检测限范围内。确定检出限,回收率,方法重复性,精密度等。



4.样品测定和计算


记录了标准品色谱峰的保留时间,进样到HPLC测定,识别出样品的色谱峰,并对它进行手动或自动积分。代入到回归方程,可以计算出样品中的甜菜红素的含量。


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