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茶氨酸含量检测方法
来源: | 作者:上海优选生物 | 发布时间: 2025-04-24 | 12 次浏览 | 分享到:
在制备茶叶的时候,我们会发现一种特有的氨基酸,它是游离状态的,且呈L型的茶氨酸。它的化学式是C7H14N2O3,分子量为174.2,易溶于水,具有焦糖香味和味精的鲜爽。遇到强酸的时候,茶氨酸会被水解为L-谷氨酸和乙胺,茚三酮反应呈紫色。茶氨酸有很多的药理功能,比如镇静,减肥,降血脂,抗疲劳,抗衰老,增强记忆,提高免疫力等。茶氨酸约占茶叶氨基酸总量50%~60%,化学名称为N-乙基-L-谷氨酰胺。

在制备茶叶的时候,我们会发现一种特有的氨基酸,它是游离状态的,且呈L型的茶氨酸。它的化学式是C7H14N2O3,分子量为174.2,易溶于水,具有焦糖香味和味精的鲜爽。遇到强酸的时候,茶氨酸会被水解为L-谷氨酸和乙胺,茚三酮反应呈紫色。茶氨酸有很多的药理功能,比如镇静,减肥,降血脂,抗疲劳,抗衰老,增强记忆,提高免疫力等。茶氨酸约占茶叶氨基酸总量50%~60%,化学名称为N-乙基-L-谷氨酰胺。



实验室常用的检测方法有,紫外分光光度法,高效液相色谱(HPLC)法,液相色谱质谱联用(LC-MS)法等。以HPLC为例,介绍一下检测流程。


1.样品前处理


将茶叶样品研磨成碎末,准确称量0.5g,加入100ml的纯净水,这可不是泡茶。在80℃的水浴上摇床,摇呀摇,浸提45min。拿出来,冷却后就要进行离心,0.45um膜过滤,待测。



2.色谱条件


C18的色谱柱,250mm长,4.6mm内径,5um的粒径;柱温35-40℃。用乙腈和水梯度洗脱,也可以选择其他有机溶剂配比,流速1ml/min。紫外检测器,波长210nm或335nm,进样量10-20uL。根据实际环境进行调整,确保比较好的出峰效果。



3.标准曲线


称取少量茶氨酸(一般用L-茶氨酸)标准品,用纯净水或有机溶剂溶解并稀释至0.01 mg/mL, 0.02 mg/mL, 0.5 mg/mL, 0.1 mg/mL, 0.15 mg/mL, 0.2 mg/mL。依次进样到HPLC中,以上述的色谱条件,测出对应的色谱峰,峰面积进行积分。对应各个标准溶液,绘制出标准曲线,得到回归方程。


4.样品测定和计算


将样品溶液进样到HPLC中,和标准品相同的色谱条件,记录出峰的情况。根据保留时间识别目标化合物的峰位置,对峰面积进行积分,代入到回归方程,就可以计算出样品中的茶氨酸含量。另外,有的还需要计算检测限,相关系数,线性范围,回收率,重复性等。


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