石斛碱主要来源于中药材铁皮石斛等的茎部，是一种吡咯里西啶衍生物。它是含氮的有机化合物，化学式为C16H25NO2，分子量为263.27，易溶于乙醚、氯仿，难溶于乙醇、水。它具有多种药理作用，比如止痛和解热，降低心律和血压，促进消化和调节免疫力等。它的生物活性与木防己毒素相似，根据分子结构来判断属于倍半萜类生物碱，可应用于药物代谢研究等领域。

检测样品中的石斛碱含量，实验室常用的方法有高效液相色谱（HPLC），气相色谱（GC），液相色谱-串联质谱（LC-MS/MS）等。

以HPLC为例

1.样品处理

获取中药材铁皮石斛或其他种类的植物样品，进行粉碎过筛，精密称量5g，置于25ml的容量瓶中，加入20ml的甲醇，超声提取30min。取出，在室温下冷却，用甲醇定容。用0.22um的微孔滤膜过滤，待测。

2.色谱条件

C18的色谱柱，长250mm，内径4.6um，粒径5um。柱温30℃。甲醇和磷酸二氢钾（KH2PO4）（65:35）为流动相，等度洗脱，流速1ml/min。紫外检测器，波长260nm，进样量10-20uL。根据实际环境条件和设备参数，进行适当的调整。比如有用水+乙腈为流动相，梯度洗脱，尽可能的将样品中的石斛碱洗脱出来，并在检测器中显示完整有效的色谱峰。

3.标准曲线

准确称取石斛碱的标准品，放在10ml的容量瓶中，用甲醇进行溶解，梯度的稀释成5-7个浓度点作为标准工作溶液，记录浓度值。在有效的色谱条件下，注射到HPLC中，或手动或自动，在软件中记录色谱峰的保留时间和位置。观察色谱图的出峰情况，将几个色谱峰面积进行积分处理，对应到每个峰的标准溶液浓度，在表格中可以绘制出标准曲线。可以看到相关系数r2一般是大于0.999，确保测定数据在良好的线性范围内。

4.样品测定和计算

将样品注入HPLC中，和标准品相同的色谱条件下，测定并记录色谱峰和数据。对目标色谱峰进行识别，并对峰面积进行积分，代入到回归方程，计算出样品的石斛碱含量。考察精密度，样品稳定性，回收率，方法重复性。