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植物异戊烯基腺苷(IPA)含量检测方法
来源: | 作者:上海优选生物 | 发布时间: 2025-04-14 | 28 次浏览 | 分享到:
异戊烯基腺苷(IPA)是一类具有腺嘌呤环结构的植物激素,它是一种结合态细胞分裂素,IPA结合在tRNA上,主要存在根尖,茎尖,芽尖,幼叶,种子或未成熟的果实中。能够促进细胞的分裂和诱导芽的分化,促进叶绿体的发育,养分运输,延缓植物的衰老等作用。异戊烯基腺苷的化学式为C15H21N5O4,分子量为335.358,可以溶于乙醇、乙醚和苯等有机溶剂。

异戊烯基腺苷(IPA)是一类具有腺嘌呤环结构的植物激素,它是一种结合态细胞分裂素,IPA结合在tRNA上,主要存在根尖,茎尖,芽尖,幼叶,种子或未成熟的果实中。能够促进细胞的分裂和诱导芽的分化,促进叶绿体的发育,养分运输,延缓植物的衰老等作用。异戊烯基腺苷的化学式为C15H21N5O4,分子量为335.358,可以溶于乙醇、乙醚和苯等有机溶剂。


检测方法:液相色谱串联质谱(LC-MS/MS),高效液相色谱(HPLC),酶联免疫吸附(ELISA)法等。



以液相色谱串联质谱(LC-MS/MS)为例,它是通过HPLC将细胞分裂素分离出来,并进入串联质谱仪,测定离子的质荷比(m/z)。根据质谱峰面积和标准曲线,计算出样品中的IPA的含量。主要用于含量微小的样品,这里简单的介绍一下流程。


1.样品处理


将植物样品在液氮下研磨后充分混匀取约0.3g(精确至0.0001g)样品于15mL离心管中,加入5mL提取溶液异丙醇:水:甲酸(80:19:1,V/V),匀质2min,放置4 度超声提取1h,浸提液以10000r/min离心10min得上清液。然后再加入1ml二氯甲烷,低温超声提取30min,10000r/min离心10min得上清液,重复超声提取一次,合并3次上清液。室温氮气减压至水相,定容至1ml,振荡混匀,用甲醇稀释2倍后过0.22μm滤膜,待测。


2.色谱和质谱条件


C18色谱柱  2.1*100mm 1.7μm,柱温:35 °C,流速:0.3mL/min,流动相组成:A-0.1%甲酸水 B-乙腈 梯度洗脱,离子模式 ESI±模式。


3.标准曲线和含量计算


根据质控实验来确认目标峰保留位置,得到峰面积数据,根据内标、标准曲线及样品稀释倍数,计算实际样品中的含量。


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