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谷氨酰胺检测方法
来源: | 作者:上海优选生物 | 发布时间: 2025-04-10 | 30 次浏览 | 分享到:
谷氨酰胺是一种非必需氨基酸,在人的肌肉中是通过谷氨酰胺合成酶,将谷氨酰胺盐和氨合成而来,也有用葡萄糖在体内转变来的。通过食物获取,一般有瘦肉类,豆类,蛋类,海鲜类等。谷氨酰胺在人体内的主要作用,包括增强肌肉量、促进肝脏健康、改善肠道健康、提高免疫系统功能、减轻压力等。谷氨酰胺分子式为C5H10N2O3,由一个α-氨基基团、一个羧基、一个侧链和一个酰胺基团组成。在水中溶解,在乙醇或乙醚中几乎不溶。

谷氨酰胺是一种非必需氨基酸,在人的肌肉中是通过谷氨酰胺合成酶,将谷氨酰胺盐和氨合成而来,也有用葡萄糖在体内转变来的。通过食物获取,一般有瘦肉类,豆类,蛋类,海鲜类等。谷氨酰胺在人体内的主要作用,包括增强肌肉量、促进肝脏健康、改善肠道健康、提高免疫系统功能、减轻压力等。谷氨酰胺分子式为C5H10N2O3,由一个α-氨基基团、一个羧基、一个侧链和一个酰胺基团组成。在水中溶解,在乙醇或乙醚中几乎不溶。



检测样本中谷氨酰胺的方法,有滴定法,酶学,电化学法,高效液相色谱(HPLC)法,质谱(MS)法等。


以HPLC为例,介绍一下检测的流程,具体操作步骤需要结合相关的文献资料或权威标准。


1.样品处理


如果是粉末的话,可以进行精密称量,加蒸馏水稀释成2.5g/L的溶液。


2.色谱条件


C18的色谱柱,这是常用的,以辛烷磺酸钠和乙腈(95:5)为流动相,等度洗脱,流速1ml/min;紫外检测器,波长210nm;进样量10uL,根据实际情况进行调整。方法并不是死的,是可以根据样品和实验环境条件来选择的。可以用这种流动相,也可以用那种流动相。可以用等度洗脱,也可以梯度洗脱。如果固执住一种方法,如果样品变化了,而测不出来的话,就不能确定是样品还是方法。如果样品中确实没有或很少,提取方法有限的情况下,需要考虑更高精密度的设备。如果是提取过程需要优化,而不能怪方法不够精准。


3.标准曲线


取谷氨酰胺对照品适量,精密称定,放在一个容量瓶中,加水溶解并稀释成12.5ug/mL的溶液。梯度稀释6个浓度点,最低点确保在检测器有效范围内,一般是以信噪比的5-10倍为定量限。以有效的色谱条件,依次测出各个标准溶液的色谱峰。对峰面积进行积分,对应标准溶液浓度,绘制出标准曲线,得到回归方程。


4.样品测定和计算


对样品的检测,是基于标准品能够出一个比较好的色谱峰。并且记录这个色谱峰的保留时间,等用同样的色谱条件测样品的时候,也会在这个地方出现色谱峰。如果没有出现,就要看一下是不是其他方面的问题。在样品测试的过程中,由于杂质的影响或溶剂和样品的混合不确定性,可能会出现色谱峰不稳定的或不符合预期的情况。需要根据实际情况进行调整,或重新测试。如果是相对理想的色谱峰,结合回归方程,是可以计算出样品中的谷氨酰胺含量的。


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