桔青霉素，又称为橘霉素，是一种由霉菌产生的真菌毒素。它能够污染玉米，大米等农作物，对人和动物有一定的毒害作用。化学式为C13H14O5，分子量为250.247，溶于甲醇、乙醇、丙酮、乙酸乙酯、苯、正己烷等。主要用作微生物源杀虫杀螨剂，用于果树防治各种有害螨。对于食品添加剂，根据相关标准规定，桔青霉素的限量为0.04 mg/kg。

测定桔青霉素含量，主要方法包括酶联免疫吸附（ELISA）法、气相色谱（GC）法、高效液相色谱（HPLC）法、液相色谱-串联质谱（LC-MS/MS）法等

这里以HPLC为例，简单的介绍一下检测的流程和方法。如果有需要检测的，而且自身有设备和环境条件的，可以查询一下相关的文献和标准，严格按照操作步骤去完成。这里不仅考查的是样品和桔青霉素的基本物理和化学性质，还需要对仪器的各个部件及功能进行充分的、系统的了解，达到熟练掌握的程度。因为，在后续的检测过程中，需要通过验证或开发色谱方法，不仅要从样品出有效的分离出来，还要在检测器中获得相对理想的目标色谱峰，便于准确的计算出含量。

1.样品处理

将样品（如大米，辣椒，玉米等）充分的粉碎，研磨成粉，过筛。准确的称取10g到150ml的具塞锥形瓶中，这个时候向里面加入50ml的甲醇-水（70：30）的提取液。高速离心2min，过滤提取液。提取1ml滤液出来到另外的一个容器中，加入49ml的10mmol/L的磷酸溶液（pH7.5）稀释，混匀，用玻璃纤维纸过滤，并进行后续免疫亲和柱净化，待测。

2.色谱条件

采用C18的色谱柱，150mm，内径4.6um，粒径5um，柱温30℃；流动相A-乙腈，B-10mmol/L磷酸（pH2.5），梯度洗脱，流速为1ml/min。检测器激发波长350nm，发射波长500nm。进样量50ul，根据实际情况进行验证和调整。

3.标准曲线

配制0.0ng/mL、1.0ng/mL、2.0ng/mL、5.0ng/mL、10.0ng/mL、20.0ng/mL6个浓度的桔青霉素标准工作液。在相对较好的色谱条件下，用配制好的这6个标准工作溶液分别进样,以相应的桔青霉素的色谱峰的峰面积为纵坐标，以对应的标准溶液的浓度为横坐标，绘制标准曲线，得到回归方程。

4.样品测定和计算

将试样溶液注入高效液相色谱仪，以上述的色谱条件，测定相应的峰面积。由标准曲线的回归方程，可以计算出试样溶液中桔青霉素的含量。