维生素b2，又称为核黄素，是B族维生素的一种。化学式为C17H20N4O6，分子量376.37，微溶于水，可溶于氯化钠溶液，稀的氢氧化钠溶液，在强酸溶液中稳定。光照和紫外照射，可对它产生不可逆的分解。广泛存在于酵母、肝、肾、蛋、奶、大豆等中，它不会蓄积在体内，需要经常的从食物中获取。

在生物体内，维生素b2主要参与多种生化反应。比如，生物氧化和能量代谢，参与维生素b6和烟酸的代谢，并具备抗氧化活性。食物中的维生素b2是以黄素单核苷酸（FMN）和黄素腺嘌呤二核苷酸（FAD）辅酶形式和蛋白质结合存在，当它进入人的胃中的时候，在胃酸的作用下和蛋白质分离，转变成游离的维生素b2，在小肠部位被吸收。它的主要功能是促进代谢，促进细胞的再生，让皮肤，指甲，毛发能够正常生长，预防口腔和皮肤的炎性疾病，增进视力，降低眼睛疲劳等。

实验室的检测方法，一般包括高效液相色谱（HPLC）和比色法。都可以用，根据实际情况来选择检测。这里以HPLC为例，简单的介绍一下检测流程和注意问题。

1.样品处理

在处理样品之前，要了解样品的物理和化学性质，根据维生素b2的特点来确定方法。根据文献方法或成熟的处理步骤进行，比如称取5g样品，在250ml的锥形瓶中，加入盐酸溶液10mL，摇匀。这个盐酸溶液是需要提前准备好的，通过121℃高温加热30min，冷却至室温。用氢氧化钠溶液调节pH值到4.5，使得蛋白质沉淀，转移到适量的棕色容量瓶中，定容，摇匀，过滤。滤液再经过0.45um滤膜过滤，待测或避光保存。

2.色谱条件

确定色谱检测方法，其实是对维生素b2的基础的物理和化学性质的考查。举个例子，采用C18的色谱柱，150mm×4.6mm，5μm；柱温30℃，以甲醇和0.05mol/L的乙酸钠溶液（35:65）为流动相，流速1.0ml/min。进样量10-20uL，紫外检测器，波长440nm，根据实际情况进行验证和调整。

3.标准曲线

使用标准品溶解，进行适当的、梯度稀释6个浓度点。最低点要在检测器的有效检测范围，一般选择是机器信噪比的5-10倍。根据比较适合的色谱条件，依次上机测定它们的色谱峰。对色谱峰面积进行手工或自动积分，对应各个点的浓度值，在表格中使用函数公式，绘制出标准曲线，得的回归方程，相关系数r2一般情况下要大于0.999。有的时候，为了需求，需要对方法的重复性，精密度，回收率等进行确认。

4.样品测定

怎么确定样品出来的峰就是目标化合物的峰呢，通过对标准品的检测，程序是相同的，那么保留时间也应该是一样的。通过对样品的色谱峰面积进行积分，结合回归方程，是可以计算出样品中的维生素b2的含量的。