α-酮戊二酸，化学式为C5H6O5，分子量为146。它广泛的存在自然界中，比如菠菜中就有丰富的α-酮戊二酸。α-酮戊二酸是谷氨酸、谷氨酰胺和精氨酸的前体物质，通过细胞代谢过程产生。也可以通过生物合成的方法，具有促进能量代谢，增强抗氧化能力，保护骨骼健康，提高免疫力，保护神经等作用。α-酮戊二酸是三羧酸循环的中间代谢产物，是谷氨酸、谷氨酰胺和精氨酸的前体物质，参与维生素和有机酸的合成和代谢。

检测样品中α-酮戊二酸的方法，有高效液相色谱（HPLC）法，有比色法，也有酶联免疫吸附（ELISA）法。比色法和ELISA法是可以通过试剂盒的形式，按照说明书的要求，按部就班完成操作，注意一下试剂和操作的问题。这里以HPLC为例，简单的介绍一下检测过程。

1.α-酮戊二酸的提取过程

将样品研磨粉碎，过筛，准确称取1g，放入50ml的容量瓶中，加入45ml的乙酸乙酯，超声处理30min，静置过夜。过夜后，加入乙酸乙酯定容，过滤后，吸取25ml滤液蒸干，加入甲酸溶解，定容到10mL，待测。

2.色谱条件

C18的色谱柱，250mm长，4.6mm内径，5um粒径，柱温30℃；以磷酸二氢钠溶液（pH3.3-3.5）和水为流动相，等度洗脱，流速1ml/min，进样量10-20ul，紫外检测器，波长205nm，仅供参考。在实际情况下，需要对条件进行验证或重新开发，充分优化色谱条件。这个过程，考验的是实验人员对机器设备性能参数的熟悉，对样品及目标化合物的物理和化学性质的了解。

3.标准曲线

首先，就要对标准品用流动相或理想的有机溶剂进行配制。一般情况下，为了更准确起见，采用外标法。也就是标准曲线，梯度稀释6个点，在检测器的有效检测范围内。进样到HPLC，测出来色谱峰，对面积进行积分。对应6个不同的浓度，在表格中用函数来绘制出标准曲线，得到回归方程，r2需要大于0.999。有的时候，还需要验证回收率，重复性，精密度等。样品中的α-酮戊二酸含量，就是根据样品的色谱峰面积，和回归方程，计算出来的。