丙酸是一种短链脂肪酸,化学式为CH3CH2COOH,分子量74.08,在水溶性中呈弱酸性,但有腐蚀性。能溶于水,乙醇,氯仿和乙醚等。一般通过化学合成和微生物发酵法得到。暂且不说化学合成,就微生物发酵来说,是通过甘油,葡萄糖,乳酸或乳糖等,在丙酸杆菌的作用下代谢产生。丙酸是一种重要的化工原料,它广泛的应用在食品,饲料,香料,医药,农药,印刷等领域,比如,防腐剂,饲料添加剂,香料中间体,医药中间体,化妆品添加剂等。
丙酸是一种短链脂肪酸,化学式为CH3CH2COOH,分子量74.08,在水溶性中呈弱酸性,但有腐蚀性。能溶于水,乙醇,氯仿和乙醚等。一般通过化学合成和微生物发酵法得到。暂且不说化学合成,就微生物发酵来说,是通过甘油,葡萄糖,乳酸或乳糖等,在丙酸杆菌的作用下代谢产生。丙酸是一种重要的化工原料,它广泛的应用在食品,饲料,香料,医药,农药,印刷等领域,比如,防腐剂,饲料添加剂,香料中间体,医药中间体,化妆品添加剂等。

因为它是短链脂肪酸,检测的主要方法是气相色谱(GC)。当然,也有其他的方法,比如高效液相色谱(HPLC),分光光度法等。
1.样品处理
拿一个1.5ml的离心管,要棕色的。用精密的电子天平,称取0.1g的样品,准确的放入到棕色离心管中。此时,加入1ml的20%磷酸水。离心管要盖上盖子,放到振荡器上振荡混匀1min。混匀后,要放到4℃冰浴中,超声30min。放在冰浴中,可能是为了防止超声过程中丙酸挥发出去,样品中的含量就会减少,导致后面的检测不准确吧。接着,把离心管放在13000r/min离心机中离心30min。拿出来后,用移液器吸取上清液,用0.45um的膜过滤,就准备检测了。

2.色谱测试条件
这个条件很重要,是能不能测出来的关键步骤。每个参数值的设置范围,直接决定了测试结果。这个不仅要靠经验,更需要结合实际情况去探索和开发。不仅需要时间,考验试错,容错的能力。当然,如果自己开发出来,而且测试结果很理想,那这套方法就是很珍贵了。不仅要对目标化合物的物理和化学性质足够掌握,还能了解气相色谱的各个部件和参数的作用,组合优化。

比如,采用N2为载气,用DB-FFAP的色谱柱。进样口温度270℃,检测器温度280℃,氢气的流速为50ml/min,氮气的流速为30ml/min,空气流速为500ml/min,分流比是50:1;程序升温,初始温度80℃保持4min,然后10℃/min升高到180℃,保持1min。进样流速2ml/min,进样量1uL。
3.标准曲线
将标准品溶解,采用6个点的梯度稀释,进样到色谱仪中。对峰面积进行积分,对应标准品溶液浓度,用表格函数绘制标准曲线,得到回归方程。有时候,需要做方法学验证,确保数据的可靠性。
4.样品测定
样品的测定,是和标准品相同的色谱条件,将测出来的色谱峰面积也进行积分。然后,代入到回归方程中,计算出样品中的丙酸含量。