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辅酶Q10的检测方法
来源: | 作者:上海优选生物 | 发布时间: 2025-03-17 | 103 次浏览 | 分享到:
辅酶Q10是能够进行有氧呼吸的真核生物中的一种辅酶,又称为泛醌。Q是醌基,10是尾部接上的异戊二烯的数量。它是一种苯醌类的脂溶性化合物,在生物体内的线粒体内膜形成。可以通过食用坚果,橘子,西兰花等水果蔬菜获得。辅酶Q10在人体中分布很广泛,比如组织,血浆等,主要是参与线粒体的氧化磷酸化和ATP的产生,调控细胞氧化还原,加速细胞的更新换代。从药理机理来看,辅酶Q10具有抗机体衰老,抗疲劳,提高肌肉能量,调节免疫的作用。

辅酶Q10是能够进行有氧呼吸的真核生物中的一种辅酶,又称为泛醌。Q是醌基,10是尾部接上的异戊二烯的数量。它是一种苯醌类的脂溶性化合物,在生物体内的线粒体内膜形成。可以通过食用坚果,橘子,西兰花等水果蔬菜获得。辅酶Q10在人体中分布很广泛,比如组织,血浆等,主要是参与线粒体的氧化磷酸化和ATP的产生,调控细胞氧化还原,加速细胞的更新换代。从药理机理来看,辅酶Q10具有抗机体衰老,抗疲劳,提高肌肉能量,调节免疫的作用。



分子式为C59H90O4,分子量为863.36,其结构类似于维生素K和维生素E,易溶于氯仿、苯、四氯化碳等有机溶剂,微溶于乙醇,不溶于水和甲醇。


检测样品中的辅酶Q10的含量,实验室的方法,主要是通过高效液相色谱(HPLC)来完成的。它包含了样品前处理,色谱方法,色谱峰(标品+样品),标准曲线,含量计算,方法学等过程。


1.样品前处理:精密称量20mg样品,加入大约40mL的无水乙醇,在50℃的水浴中溶解振荡。溶解完成后,拿出来放冷,移到100mL的量瓶中,还是用无水乙醇定容到刻度,待测。



2.色谱条件:C18色谱柱,250mm长,4.6mm内径,5um粒径,35℃柱温;以甲醇-无水乙醇为流动相,等度洗脱,流速1ml/min;紫外检测器,波长275nm,进样量20ul,仅供参考。根据实际情况,需要验证或重新开发方法。


3.标准曲线:先用辅酶Q10的标准品,用无水乙醇溶解成0.2mg/mL的溶液。梯度稀释6个浓度点,记录浓度值。进样到hplc测色谱峰,对测出来的色谱峰面积进行积分处理。通过excel函数,将峰面积和对应浓度组合起来,绘制成标准曲线图,得到回归方程,r2需要大于0.999,确保结果的准确性。


4.含量计算:前面的所有步骤,都是铺垫。样品的测定,才是正戏。将样品进行必要的稀释,进样到hplc中,用和标准品同样的色谱条件,测出来辅酶Q10的色谱峰。其实,每个物质的出峰时间是相接近的,可以判断出样品的辅酶Q10的位置,对峰面积进行积分。根据峰面积,和回归方程,计算出样品中的辅酶Q10含量。


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