芍药是一味中药材,具有滋阴的作用。芍药苷是从赤芍、白芍的根茎中提取出来一种单帖类的苷。除了芍药,其实芍药科的植物都有,比如牡丹根等。芍药苷在植物的体内有生物活性的作用。从药理学的角度来分析,它具有抗氧化、消炎等作用。检测中药材芍药苷的含量,现在用的比较多的有高效液相色谱(HPLC)法、气相色谱(GC)法、紫外可见光谱法、质谱(MS)法。

芍药苷的测定,这里以高效液相色谱(HPLC)法为例,说一下检测流程。
1.工作原理
对样品进行处理,比如有机溶剂提取、超声、过滤等,进入色谱柱内进行分离,使用紫外吸收检测器,在230nm的波长处检测,使用标准品,制作标准曲线,并计算出样品中芍药苷的含量。
2.准备试剂和仪器
这里采用的试剂有:色谱级的乙腈、磷酸标准溶液、乙醇。检测仪器就是高效液相色谱了,液相色谱检测是一个系统,包括色谱柱,这里用到的是C18的柱子,紫外检测器。设置参数,调节波长。流动相就是刚刚说的乙腈 0.1%磷酸溶液 = 15:85。

3.准备样品和标准对照品
样品可以取芍药科的植物或中药材,取适量并研磨均匀,精密称量0.1g。芍药苷的对照品,也是要准备好的,这个可以取1mg,加乙醇配置成0.1mg/ml的标准品溶液。标准品配置好就可以用了,但样品就不行了,对样品要先加入乙醇25ml,可以参考国标。超声处理30min,冷却称量定容,过滤后备用。这个过程,要避免出现失误,以免影响到溶液的浓度。
4.标准曲线的制作
对标准品进行4,7,10,13,16μL分别注入液相色谱,并在230nm的波长处进行测定峰值。根据峰面积积分对进样量进行回归,绘制标准曲线。
5.样品测定
分别精密吸取上述对照品溶液与供试品溶液各10μL注入高效液相色谱仪,用紫外吸收检测器,于波长230nm处测定芍药甙的峰面积积分值,用外标法计算出芍药甙的含量。