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植物组织中纤维素含量的测定
来源: | 作者:上海优选生物 | 发布时间: 2024-03-29 | 218 次浏览 | 分享到:

纤维素是植物细胞壁的主要结构组成,它通过半纤维素、果胶、木质素相互结合起来,就像给植物的内部盖了一个房屋。从本质上来说,纤维素是一种由葡萄糖组成的大分子多糖物质。它是自然界中分别最多的一种多糖,而且占比很高,比如棉花,纤维素接近100%。蔬菜和水果中含有丰富的纤维素,它虽然是多糖,大多数情况下是不能被人体吸收的。



植物纤维素含量越高,在一定程度上说明这个植物细胞的组织结构很发达。就像人的肌肉很强健一样,植物的结构结实了,就可以避免被风或外在的力量压到。而且,纤维素含量越高,抗病虫害的能力也越强。就像植物给自己建立了一个城堡,城墙越厚,受到外在侵害的几率就会越低。因此,检测植物中纤维素的含量,是判断出来这个植物的品质的一项重要指标。



那么,检测植物组织中的纤维素含量,应该用什么方法比较好呢?这要从纤维素的本来性质说,掌握了它的性质变化,才能进行量化。纤维素是由β-葡萄糖残基组成的多糖,那么只要确定好β-葡萄糖残基的含量,就可以测定纤维素含量了。在酸性的条件下,对纤维素进行加热,就会分解为β-葡萄糖了。那剩下的问题,就是检测β-葡萄糖的含量了。β-葡萄糖在强酸作用下,可脱水生成β-糠醛类化合物。β-糠醛类化合物与蒽酮脱水缩合,生成黄色的糠醛衍生物。通过判断反应过程颜色的变化,以及变化程度可间接测定纤维素含量。



这里介绍就是分光光度法,测定植物组织纤维素的含量,常规来说就要先做标准曲线,现在有的检测或科研机构已经使用生化检测试剂盒。如果没有的话,需要配置相关试剂,准备必要的实验器材。


1.纤维素标准曲线


准备纤维素的标准品,分别吸取0,0.40,0.80,1.20,1.60,2.00ml到试管中,对应次序,加入2.00,1.60,1.20,0.80,0.40,0ml蒸馏水,摇匀。此时,纤维素标准品的6个梯度浓度已经准备好了。记录一下分别的浓度值,然后向每个试管中加入0.5ml2%蒽酮和5.0ml浓硫酸,轻轻的摇匀,戴好塑胶手套,避免液体溅出来。静置10min后,在620nm的波长下,倒入比色皿内,上机测定不同浓度的溶液的吸光度。可以多次几次,求取平均值。根据吸光度和浓度的对应关系,制作标准曲线,计算出回归方程。



2.检测样品纤维素含量


对植物样品要先进行处理,放在水浴中,加入60%的硫酸若干毫升,消化30min。消化后的纤维素溶液,转入到100ml的容量瓶中,还是用60%的硫酸定容到100ml刻度。摇匀后,过滤到另外一个烧杯中。然后,取这个过滤液5ml,再放入到100ml的容量瓶中,在冷水浴中加蒸馏水稀释到刻度,摇匀后备用。此时,要知道现在的稀释倍数。


按照以上的方法,吸取2ml纤维素溶液到试管中,加入0.5ml2%蒽酮和5.0ml浓硫酸,轻轻的摇匀,静置10min,在620nm波长下,在分光光度计上读取吸光度。根据测定的吸光度,按照回归方程可以求出纤维素的含量。


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