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香豆素含量测定的方法
来源: | 作者:上海优选生物 | 发布时间: 2024-03-28 | 38 次浏览 | 分享到:

香豆素又称为香豆精,是一种有机化合物。它的学名是1,2-苯并吡喃酮、邻氧萘酮。香豆素一般是以游离状态,或以甙的形式存在,并广泛的存在植物界。在植物的伞形科、豆科、芸香科、菌科、木樨科最多。香豆素有一种特别的香气,能够用于配置香料或香水。更深一步,还可以用在食品、塑料制品等。



随着人们对香豆素的研究,发现它还有很多生理活性,具有抗菌、镇静等作用,香豆素因环外基团不同而有多种衍生物:羟基香豆素类、呋喃香豆素类、吡喃香豆素类、双香豆素类、双氢异香豆素等。香豆素在植物体内的生理作用,目前还不是很清楚,需要进一步的深入研究和探索。


检测样品中香豆素的含量,我们通常情况下采用高效液相色谱(HPLC)法或液质(LC-MS)法测定。这里简单说一下,高效液相色谱检测的操作过程。如需要进一步的了解,可以参考相关的标准或咨询专业的老师。


1.样品处理


将含有香豆素的样品进行粉碎,加入适量的有机溶剂,比如甲醇或乙腈,具体的要根据实验方案来定,后采用超声波处理使其充分的溶解。然后通过0.22um的微孔滤膜过滤,去掉其中的悬浮物或颗粒物,从而获得相对纯净的溶液。



2.色谱检测


设置好液相色谱仪的色谱检测条件,比如流动相组成比例并配置,流速、柱温、检测器波长等参数。如果没有标准的方法,需要进行验证,从而获得检测样品清晰图谱的参数。香豆素检测根据其保留时间定性,外标法定量。将样品通过自动进样器注入到HPLC的色谱柱中,色谱柱采用常用的C18正相柱,紫外检测器波长254nm。通过检测器对香豆素进行定量测定,得到其峰面积或峰高,并与标准曲线进行定量分析。利用色谱软件对测得的数据进行处理,计算出香豆素的含量。


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