在肥沃的土壤中,有很多种类的酶。目前,已经发现的主要酶类包括磷酸酶、脲酶、蔗糖酶、纤维素酶等。磷酸酶根据土壤ph值的不同,还可以分为碱性磷酸酶、中性磷酸酶和酸性磷酸酶。
那么,磷酸酶到底有什么作用呢?酶是有活性的,它能够催化土壤中的有机磷发生水解反应,生成无机的磷酸盐,从而释放出可以供给植物生长所需要的磷元素。磷元素在植物体内,能够促进能量的生成,从而保障植物细胞不断的分裂代谢。同时,丰富的磷元素可以让植物的果实更大、更有品质。因此,检测土壤磷酸酶的活力,可以判断出土壤有机磷的供应能力,这是评价土壤肥力的重要指标之一。

检测土壤中酶活的方法,大致上有比色法、滴定法、酶标法等。其中,比色法是一种常见的测酶活性的方法。它是通过特定的底物和指示剂,在酶发生作用的过程中出现颜色变化,通过这个颜色的变化来反映反应程度,从而计算出酶的活力。随着科技的发展,为了更快的实现酶活检测,采用生化检测试剂盒,可以在酶标仪上高灵敏读取数据,更快更方便。

比色法测磷酸酶活性,要先配置缓冲液,使用标准品溶液梯度稀释7个点。分别加入5 ml硼酸盐缓冲液和4滴氯代二溴对苯醌亚胺试剂,显色后稀释至刻度,30 min后,在分光光度计上660 nm处比色。以显色液中标准品不同浓度为横坐标,吸光值为纵坐标,绘制标准曲线。
操作步骤:
1、称2g鲜土(5g干土)于200ml三角瓶中,加2.5ml 甲苯,轻摇15min后,加入20ml 0.5%磷酸苯二钠,仔细摇匀后放入恒温箱,在37℃下培养24h。
2、到时取出,于培养液中加40ml 0.3%硫酸铝溶液并过滤。
3、吸取3ml滤液于50ml容量瓶中,然后加入5ml pH9.4硼酸盐缓冲液,充分摇匀后,加入5滴氯代二溴对苯醌亚胺试剂,充分摇匀至显色明显后定容,30min后比色测定。