生物素，其实是维生素H，是B族维生素，也是水溶性维生素。它是合成VC的必要物质，是脂肪和蛋白质代谢过程中不可缺少的，也是人体生长和发育必要的营养物质。生物素的来源比较广泛，比如鸡蛋，肉类等。当然，植物中也是非常多的，特别是豆类，坚果，种子，蔬菜和谷物，甚至连香蕉这样的水果都含有。生物素的化学式为C₁₀H₁₆N₂O₃S，分子量为244.31，可溶于水、酒精、氯仿、二甲亚砜等溶剂。生物素促进生物体内的物质代谢，维持神经系统功能，增强免疫力，促进生长发育。

检测样品中的生物素含量，科研实验室的方法是高校液相色谱（HPLC）法、液相色谱质谱联用（LC-MS）法、酶联免疫吸附（ELISA）法。以HPLC为例，简单的介绍一下检测流程，如需操作，要查询相关的文献，标准或规程。

1.样品处理

不同的样品，处理方法是有差异的。比如，使用0.1mol/L的NaOH溶解，并在60℃水浴中振荡提取或超声30min，之后再进行高速离心，过0.45um的滤膜。

2.色谱条件

使用hplc就是要懂怎么设置条件，通过各种因素的整合，从而得的目标化合物的色谱峰。这个不仅要考虑目标化合物的物理化学性质，还需要结合色谱的知识，获得相对可靠的数据结果。比如，C18色谱柱，长150mm，内径4.6mm，粒径5um；柱温35℃；流动相为磷酸盐缓冲液：乙腈=85:15，流速为1ml/min；紫外检测器，波长210nm，进样量10-20ul。

3.标准曲线

标曲就是用标准品，通过溶解稀释，配制出5-7个呈梯度的标准溶液。用流动相或特定的有机溶剂溶解，那就有问题出现了。要溶解到什么浓度，这最低点的浓度应该是多少，不能随便配一些梯度就上机吧。这个就要考虑检测器的特性，找到检测的有效线性范围，比如检测限的5-10倍。

当色谱出峰的时候，对各个浓度点的色谱峰面积进行积分，手动或自动。以各个点的浓度为横坐标，对应色谱峰面积为纵坐标，在坐标轴上描点划线，绘制出标准曲线。可以得到回归方程，确保相关系数r2＞0.999，这样测出来的数据，标曲才是有效的。当然，为了确保数据可靠，还需要考察重复性。

4.样品测定

对样品的测定，如果觉得比较难，怕标准品会污染色谱柱，也可以考虑先测样品，后用标准品。当然，方法都是一样的，只是浓度不一样。我们可以测出来样品的色谱峰，当基础条件都一致的情况下，根据色谱峰面积和回归方程，是可以计算出样品中的生物素含量。