加盟热线:
400-075-0108

www.sinobestbio.com

优选生物
当前位置:
新闻资讯
NEWS CENTER
烟碱含量测定方法
来源: | 作者:上海优选生物 | 发布时间: 2025-02-25 | 128 次浏览 | 分享到:
烟碱,有称为尼古丁,化学式C10H14N2,分子量为162.2,有毒。易溶于水,也溶于乙醇、乙醚、丙酮等有机溶剂。它主要存在于茄科植物中,烟草中含有的生物碱之一。科学研究证明,它会通过血液循环传输到大脑,刺激中枢神经产生心理和生理效应。

烟碱,有称为尼古丁,化学式C10H14N2,分子量为162.2,有毒。易溶于水,也溶于乙醇、乙醚、丙酮等有机溶剂。它主要存在于茄科植物中,烟草中含有的生物碱之一。科学研究证明,它会通过血液循环传输到大脑,刺激中枢神经产生心理和生理效应。



检测样品中烟碱含量的方法有多种,比如气相色谱(GC)法、高效液相色谱(HPLC)法、液相色谱质谱联用(LC-MS)法、酶联免疫吸附(ELISA)法、紫外分光光度法等。


以高效液相色谱(HPLC)法为例,简单的介绍一下检测过程。


样品前处理:将样品磨碎成粉末,用有机溶剂如75%的甲醇溶解,并用超声提取30min。具体的操作步骤,需要参考相关的文献资料或操作规程。



色谱条件:hplc的色谱条件,是根据样品的物理和化学性质来确定的。使用常规的C18色谱柱,如150mm长,内径4.6mm,粒径5um,柱温30-40℃;用0.1mol/L的磷酸二氢钾和磷酸缓冲溶液(pH2.5)或者甲醇-磷酸或甲醇-水(0.1%磷酸),等度或梯度洗脱,流速1ml/min;紫外检测器,波长260nm,进样量5-10ul。仅供参考,实际操作过程中,需要对方法进行验证,或重新开发出来。不同的设备和环境条件,测试的色谱条件是会有差异的。



标准曲线:将标准品进行溶解,逐步的,梯度稀释5-7个浓度点。有人说,怎么确定最低点的浓度呢?这个要看检测器的有效的检测范围,也就是检测限或定量限,通过信噪比的倍数,确定出您需要的最低的浓度点。通过成熟的或验证成功的色谱条件,测出各个浓度标准溶液的色谱峰。对色谱峰面积进行积分,对应标准溶液的浓度,描点绘制出标准曲线来。为什么说是标准曲线,其实它是一条线,用它来计算样品的浓度的。因为一条线上有无数个点,不知道样品的色谱峰面积是在哪个点,就用一条直线来测量。看标曲做的好不好,其实也是有要求的,比如相关系数r2>0.999,重复性RSD符合要求等。


样品测定:样品测试过程和标准品是相似的,根据测出来的色谱峰,对面积进行手动或自动积分。结合标准曲线,计算出样品中的烟碱含量。


服务热线 Online
400-075-0108