叶酸是一种水溶性的维生素，是有喋啶、p-对氨基苯甲酸和1个或多个L-谷氨酸共轭组成的。分子式为C19H19N7O6，分子量为441.397，因为绿叶中含量多，就名为叶酸。它也称为维生素B9，或维生素M，这些都不重要。它是喋啶的衍生物，不溶于冷水却溶于热水，溶于乙酸，酚吡啶，氢氧化碱等，而不溶于乙醇，丁醇，丙酮等。在酸中不稳定，易被光破坏。在动植物中含有丰富，比如蛋，甜菜，菠菜，芹菜，坚果，大豆等。

检测叶酸的方法有多种，实验室常用的是高效液相色谱（HPLC）法。

对样品要先进行前处理，这个过程不同于提取，但也属于提取。在提取的过程中，要便于后续的检测，也就是为检测服务的提取。举例，称取0.5g样品，放在100ml的棕色瓶中。上面已经提到了，叶酸对光是有敏感的，如果不注意很容易测不出来。加入70ml水，4ml碳酸氢钠溶液，水浴超声提取10min，调节ph值到8-9，摇匀，离心5min，取上清液测定。

HPLC测定，色谱条件是很重要的。比如，C18的色谱柱，常用的规格，柱温35℃；流动相为磷酸二氢钾和氢氧化钾溶液与甲醇的混合液，梯度洗脱，流速为0.8-1.0ml/min；紫外检测器，波长为254nm或280nm；根据实际情况确定进样量，一般是10-20uL。

要测叶酸的含量，有采用标准曲线的方法。就是先做一条曲线，以标准溶液的浓度为横坐标，梯度5-7个点，以测出来的色谱峰面积为纵坐标，组成一个线性的关系。我们现在还不知道样品的浓度，只能测出来色谱峰面积。根据色谱峰面积，依据这条标准曲线，是可以计算出样品中的叶酸含量的。在这个过程中，色谱条件是不变的，确定它的稳定性，重复性，回收率。为了计算的准确性，标准曲线的回归方程，相关系数r2需要大于0.999。