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LC-MS/MS测定芦笋皂苷含量
来源: | 作者:上海优选生物 | 发布时间: 2025-01-17 | 181 次浏览 | 分享到:
色谱条件:C18柱,柱温:40 °C,流速:0.3mL/min,流动相组成:A-0.1%甲酸水,B-乙腈。

使用液相串联质谱(LC-MS/MS)的方法测定皂苷的含量,在实验室科研检测过程中,需要掌握过硬的技术,对方法和设备要非常熟悉。了解皂苷的物理和化学性质,可以在处理样品的时候,更有效的提取处理,并不影响到皂苷的种类及含量。还需要了解皂苷的结构和峰的特征,在质谱峰的识别和定量计算的时候,要知道哪个是标准峰,哪个是样品峰。参考之前的方法,有时候根据样品的不同,需要进行验证。



芦笋中的皂苷具有多种的生物活性,在植物中的分布很广,特别是中药材中。它主要是由皂苷配基和糖,糖醛酸或其他有机酸组合而成的。皂苷的种类,按配基结构来说,有甾族皂苷,三萜皂苷。


检测皂苷含量,一般采用液相质谱联用(LC-MS/MS)法。


样品处理:为了能够更有效的提取出芦笋中的皂苷,主要采用溶剂提取和超声波提取。样品粉碎均匀,过 60 目筛,精确称取混匀样品 0.1g左右于20ml棕色离心管中,然后加入10ml 甲醇水提取液(9:1),振荡混匀 1min。密封后在 60℃水浴中超声振荡提取结束后,转移上清液于 20ml 棕色离心管。重复提取一次,合并两次提取液,用甲醇定容至 20ml,振荡混匀,取适量上清液稀释 10 倍后上机测定。



色谱条件:C18柱,柱温:40 °C,流速:0.3mL/min,流动相组成:A-0.1%甲酸水,B-乙腈。


质谱条件:气帘气35 arb,碰撞气7arb,离子喷雾电压-4500V,正离子模式 ESI- 离子源温度450 °C,离子源气体40a,离子源气体50 arb。



标准曲线,将处理后得到的待测液,上机检测,根据质控实验来确认目标峰保留位置,得到峰面积数据,根据标准曲线及样品稀释倍数,计算实际样品中的含量。


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