金属硫蛋白，就是存在动植物或微生物体内的金属结合蛋白。具有较强的金属结合能力，对重金属有高度的亲和性。它的分子量比较低，可以与隔，铜和锌等金属结合。金属硫蛋白有4种异构体，含有半胱氨酸和金属结合蛋白，它的巯基能够强烈的螯合有毒金属，并将它排除体外，实现解毒功能。金属硫蛋白还具有清除自由基的能力，具有美白润肤的作用。

检测植物中的金属硫蛋白含量的方法有多种，这里简单的介绍3种，如LC-MS，比色法，ELISA法。

1.LC-MS

样品制备：将0.002g的样品，放在1.5ml的离心管中，用1ml的碳酸氢铵溶解，混匀。吸取125ul到另外一个离心管中，再加入825ul的碳酸氢铵溶液，就刚刚好够1ml了，混匀后进行酶解。

酶解反应：将上述的溶液，吸取40ul出来，放到1.5ml的离心管中。加入60uL的碳酸氢铵溶液，4ul的DTT溶液，混合后37℃水浴1h，冷却至室温。加入20ul的IAA溶液，避光静置30min，对半胱氨酸进行烷基化修饰。14000r/min，4℃离心30min，加入100ul的碳酸氢铵，再离心一次。之后，加入100ul的碳酸氢铵溶液，加入10ul的胰蛋白酶溶液，混匀37℃12h-16h。将酶解反应后的溶液，4℃，14000r/min离心，再加50ul的碳酸氢铵溶液。

色谱条件：C18的色谱柱（2.1mmx50mm，1.7um）柱温30℃，样品室温度4℃。以0.1%甲酸溶液和乙腈为流动相，梯度洗脱，流速0.3ml/min，进样量4ul。

质谱条件：电喷雾电离正离子扫描模式，多反应监测（MRM），喷雾电压5500V，雾化气和辅助气压力0.379MPa，气帘气压力0.276MPa，离子源温度550℃，裂解电压70V，碰撞能量30eV。金属硫蛋白特征肽段，母离子（m/z）498.7。

可以参考GB/T38086-2019中的操作步骤。

2.DTNB比色法

DTNB（5,5'-二硫代双(2-硝基苯甲酸)）与巯基反应生成黄色的产物，这些产物在特定波长（如412 nm）下具有特征吸收峰。通过测定反应体系在特定波长下的吸光度值，通过标准曲线，可以计算出巯基化合物的含量。

3.酶联免疫吸附（ELISA）法

在预先包被金属硫蛋白（MT）捕获抗体的包被微孔中，依次加入标本、标准品、HRP标记的检测抗体，经过温育并彻底洗涤。使用底物TMB显色，TMB在过氧化物酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅与样品中的金属硫蛋白含量呈正相关，通过酶标仪在450nm波长下测定吸光度（OD值），根据标准曲线，计算样品浓度。