丹酚酸B是一种从丹参中提取的酚酸类化合物,具有抗氧化、清除自由基、抗炎抗菌等药理作用。其检测方法采用高效液相色谱(HPLC)法,通过精密称量样品并进行前处理,使用特定流动相和色谱条件进行测定。标准曲线通过梯度稀释标准溶液绘制,样品含量根据色谱峰面积和回归方程计算,需确保标准曲线的相关系数r2大于0.999,以保证结果的准确性。
丹酚酸B是一种有机化合物,由唇形科植物丹参的根及根茎提取而成的酚酸类化合物。分子式为C36H30O16,分子量为718.62,可溶于水和甲醇,乙醇,不溶于醚。化学结构中含有三个羟基和一个苯环,具有明显的酸性。具有多种药理作用,比如抗氧化,清除自由基,抗炎抗菌等作用。

检测丹酚酸B含量的方法,其实在药典中已有明确的规定,使用高效液相色谱(HPLC)法测定含量。
样品前处理:精密称量0.2g样品,放在50ml量瓶中,加入适量的甲醇,超声处理20min,放冷后加水到刻度,摇匀过滤。精密吸取1ml,放在25ml的容量瓶中,加水到刻度,摇匀待测。
色谱条件:C18色谱柱,柱温为室温。甲醇-乙腈-甲酸-水(30:10:1:59)为流动相,流速为1.0-1.2ml/min。紫外检测器,波长为286nm。进样量为20ul,仅供参考。

标准曲线:精密称取丹酚酸B的标准品,加水制成10ug/ml的标准溶液浓度。了解检测器的波长范围,得到最佳的检测浓度范围。成倍的,梯度稀释标准溶液,至少6个点。以上述的色谱条件,进样到HPLC中,测定对应的色谱峰。一般都会在进样序列中对色谱峰有编号,根据测出的色谱峰面积,对它进行积分处理。以色谱峰面积为纵坐标,对应的标准溶液浓度为横坐标,绘制标准曲线,得到回归方程。

样品测定:前处理好的样品,可以根据标准曲线的色谱条件,进样到HPLC中,测定对应的色谱峰。这个过程看起来比较容易,其实操作的过程中,可能会出现多种问题。比如色谱出峰不规则等情况,和样品的性质有关,也和进样过程的操作有关。有时候,样品浓度过高,还需要进行必要的稀释,记录稀释倍数,便于后期的含量计算。
结果计算:对结果的计算,是基于标准曲线的。根据样品的色谱峰面积,和回归方程,可以计算出样品的含量。有时候,还要考虑回收率,稀释倍数等因素。对标准曲线,也是有要求的。如果拟合的不好,测出来的结果就差别很大了。标准曲线的相关系数r2要大于0.999,接近于直线。重复性要在规定的范围内,降低偶然性误差。