己酸是一种有机化合物,主要通过乳酸发酵、化学合成和生物合成获得。它不溶于水,但溶于多种有机溶剂,常用作食用香料。高效液相色谱(HPLC)法是测定己酸含量的常用方法,涉及仪器准备、前处理、色谱条件设置、标准曲线绘制、样品检测和数据处理。色谱条件包括使用C18反相色谱柱,流动相为甲醇和水,通过调整比例和pH值优化分离效果。标准曲线通过梯度稀释己酸标准品绘制,确保检测系统的稳定性和重复性。样品测定需根据标准品条件进行,最终通过色谱峰面积计算己酸含量。除HPLC法外,还有气相色谱法和滴定法等测定方法。
己酸是一种有机化合物,属于直链羧酸。主要有三种来源:乳酸发酵,化学合成,生物合成。乳酸的化学式为C6H12O2,分子量为116.16,不溶于水,而溶于乙醇,乙醚,丙酮,氯仿,苯等有机溶剂。常用作食用香料,主要用于干酪、奶油和水果香精中。根据科学研究,有低毒。

高效液相色谱(HPLC)法测己酸含量,过程包括仪器设备及试剂的准备,前处理,色谱条件,标准曲线,样品检测,数据处理,结果计算。
色谱条件
采用C18反相色谱柱,柱温保持室温或指定的温度。分离己酸,常用的流动相为甲醇和水,通过调整有机溶剂和水的比例以及缓冲液的pH值,可以优化己酸的分离效果。流速一般为1ml/min,紫外检测器,波长为210nm,进样量10-20ul。

标准曲线
将己酸标准品,进行梯度,成倍的稀释,至少6个点的浓度。这个稀释比例不是随便的,是要考虑的是检测器的测定范围。标准品的浓度,要在检测器的有效检测范围内,从而获得相对准确的测定结果。在一定程度上,也可以判断检测系统的稳定性和重复性。检测器是一个方面,色谱条件还包括了流动相,色谱柱,柱温,进样量等,用标准品去测定色谱峰,记录理想的色谱峰。这样,对于样品测定来说,是一个比较可靠的依据。

当色谱峰出来后,要识别出来对应浓度的峰,并对它进行逐个的积分处理。以色谱峰面积为纵坐标,对应的标准溶液浓度为横坐标,绘制标准曲线。得到回归方程,相关系数r2>0.999,重复性要规定的范围内。在做方法学的时候,不能忽略了回收率。
样品测定
提取出来的样品,有的是可以直接上样的。有的是需要进行必要的稀释,让色谱峰在适宜的范围内。样品的测定,还是以标准品的测定条件。由于在对样品的了解不足,可能会出现各种不同规则的峰。如果样品中含有其他的化合物,可能会产生干扰。测定出来的有效的色谱峰,需要记录数据,并对色谱峰面积进行积分。结合标曲,是可以计算出样品中的己酸含量。
测定己酸含量的方法,不止有高效液相色谱法,还有气相色谱法,滴定法等。