金丝桃苷，属于黄酮醇苷类化合物。苷元是琥珀酸，糖基为吡喃半乳糖。槲皮素的3位O原子和糖基以β糖苷键相连，具有抗炎，降压，蛋白同化等多种生理活性，是一种重要的天然产物。化学式为C21H20O12，能够溶于乙醇，甲醇，丙酮和吡啶。分子量为464.38，通常条件下稳定。与盐酸-镁粉反应，生成樱红色，三氯化铁反应显绿色，α-萘酚反应阳性。金丝桃苷广泛的存在各种植物体内，如金丝桃科，蔷薇科，桔梗科，杜鹃科，豆科等果实和全草中。在中医药领域，金丝桃苷有重要的科研用途。

粗提的方法，一般采用乙醇热回流，甲醇热回流，乙醇或甲醇超声等方法，从粉末中对金丝桃苷进行提取。使用硅胶柱色谱对粗提物进行分离，

测定样品中金丝桃苷含量的方法，包括但不限于高效液相色谱（HPLC）法、液相质谱-串联质谱（LC-MS/MS）法等。

1.高效液相色谱（HPLC）法

样品的处理方法，其实也是粗提的方法。提取方法，直接决定了样品中能够测定出来的结果大小。常用的提取方法，包括将样品细粉置于索氏提取器中，依次加入三氯甲烷和甲醇提取，蒸干后加稀乙醇溶解，滤过，得到续滤液。详细而准确的操作过程，会让实验更顺利。

色谱条件：常用的C18色谱柱，柱温可以设置为室温，或具体的要求温度。流动相一般是有甲醇，乙腈，磷酸溶液组成的。常用的有甲醇-0.2%磷酸溶液，用三乙胺调ph值3.0。如果参考文献或标准，要把具体的过程看清楚。如果忽略了，很可能出现出峰问题。常规的流速为1.0ml/min，进样量10ul。紫外检测器，波长为370nm。以上的色谱条件，仅供参考，每次实验的进行，都会多少有所区别。可能是环境的改变，设备型号和参数的不同。

标准曲线：有的时候，担心测了标准曲线后，怕标准品会污染，也可以先测样品的。标准品溶液，需要对它梯度稀释至少6个点。这个稀释并不是随便的，而是要考虑检测器的有效检测范围，在对应的浓度点，能够重复发挥出检测器的性能。测定的色谱峰，对峰面积进行积分处理，结合对应的浓度，绘制出标准曲线。

样品测定和计算：

测定样品，记录金丝桃苷的峰面积。根据标准曲线，计算出样品中的金丝桃苷含量。

2.液相质谱-串联质谱（LC-MS/MS）法

LC-MS/MS是在液相的分离基础上，在离子源被打碎，形成质谱峰。根据质荷比（m/z）排列，通过一系列的质谱解析方法，推断出化合物的结构和化学式。根据标准曲线，可以计算出样品中的金丝桃苷含量。