加盟热线:
400-075-0108

www.sinobestbio.com

优选生物
当前位置:
新闻资讯
NEWS CENTER
紫丁香苷含量测定方法
来源: | 作者:上海优选生物 | 发布时间: 2024-12-05 | 247 次浏览 | 分享到:
紫丁香苷是一种苯丙醇苷类化合物,从欧丁香树皮和刺五加等植物中提取,具有止血和改善肝功能的作用。其化学式为C17H24O9,分子量为372.36,溶于热水和乙醇,微溶于冷水。常用高效液相色谱(HPLC)法检测其含量,使用C18色谱柱,流动相为甲醇和水,流速1.0ml/min,紫外检测波长267nm。样品处理包括甲醇回流和水浴挥干,最终通过标准曲线计算紫丁香苷含量。

紫丁香苷是一种苯丙醇苷类化合物,从木犀科植物欧丁香的树皮,以及五加科的刺五加等植物提取出来的。化学式为C17H24O9,分子量372.36,溶于热水和乙醇,微溶于冷水,基本不溶于醚。分子中包括一个羟甲基基团,一个氧环杂己烷,多个羟基和甲氧基基团。紫丁香苷能止血,促进肝脏毒物代谢,改善肝功能。



常用的检测紫丁香苷含量的方法,就是高效液相色谱(HPLC)法。


色谱柱是一个很关键的配件,柱身是圆柱形的不锈钢做成的,内部有填料,两端有压帽,密封环,筛板,接头,封头等。流动相在色谱柱中流过,样品化合物吸附在色谱柱内的填料上。流动相有有机和无机溶剂组成,在高效液相色谱(HPLC)中,流动相的初始比例通常是有机相较多。通常,流动相的初始比例设置为90%的有机溶剂(如甲醇或乙腈)和10%的水或缓冲溶液,这样可以获得比较有效的分离结果。在紫外检测器上,样品化合物会有一个比较高的吸收峰。在计算机软件中,可以记录这些信号,转变为色谱峰的形式。选择适当的波长,也是很重要的,它能清晰的显示出化合物的浓度变化。氘灯是紫外线光源,它发出的光的波长范围一般为190-400nm的连续光谱带。



根据经验,测紫丁香苷含量,一般会选择C18(250 mm ×4.6 mm,5μm)的色谱柱,柱温30℃;以甲醇和水为流动相,流速1.0ml/min;紫外检测器,波长267nm,进样量10ul,仅供参考。


样品处理方法:取5g样品,加入80ml甲醇,水浴回流2h,冷却后,甲醇定容至100ml。取续滤液50ml于蒸发皿中,水浴挥干,50ml水溶解,10ml氯仿提取两次,去氯仿层,水层再分别用水饱和过的正丁醇萃取两次。合并正丁醇层于蒸发皿中水浴挥干,甲醇定容至10ml。



标准曲线:取适量标准品,以甲醇配成1mg/ml的储备溶液,再稀释成50ug/ml的标准溶液。用甲醇梯度稀释成浓度为1.5ug/ml、5ug/ml,10ug/ml,20ug/ml,50ug/ml系列标准溶液。测定其峰面积,以浓度为横坐标,峰面积为纵坐标绘制标准曲线。得到回归方程,相关系数r2>0.999,重复性符合要求。同时,计算回收率。



数据计算:样品进样到HPLC,根据色谱条件,记录色谱峰。用色谱峰面积,结合标准曲线,计算出紫丁香苷的含量。


服务热线 Online
400-075-0108