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异鼠李素检测方法
来源: | 作者:上海优选生物 | 发布时间: 2024-12-03 | 198 次浏览 | 分享到:
异鼠李素是一种类黄酮,广泛存在于多种植物中,如银杏和沙棘,具有显著的抗氧化性能。其化学式为C16H12O7,分子量为316.27。检测方法包括高效液相色谱(HPLC)法和液相色谱-质谱(LC-MS)法。HPLC法利用固定相和流动相之间的分配系数不同,分离样品中的异鼠李素,并通过紫外检测器出峰,用标准曲线定量。LC-MS法则通过液相色谱分离样品,然后用电喷雾离子源(ESI)离子化,并通过质谱分析进行定量,适用于复杂样品的检测,并能提供分子量和结构信息。

异鼠李素是一种类黄酮,化学式为C16H12O7,分子量316.27。来源于胡颓子科植物沙棘的果实,用质谱法鉴定。后来发现,异鼠李素广泛存在于多种植物中,如银杏、沙棘等,具有显著的抗氧化性能。含量检测方法:高效液相色谱(HPLC)法



高效液相色谱(HPLC)法


原理:利用固定相和流动相之间的分配系数不同,分离样品中的异鼠李素,用紫外检测器出峰,并用标准曲线的方法定量。


样品处理:称取一定量的样品,粉末,过筛。加入适量的70%甲醇溶液,定容,摇匀,0.45um微孔膜过滤,待测。


色谱条件:采用C18的色谱柱,150×4.6mm,5μm 柱温:30℃。以甲醇-0.4%磷酸溶液为流动相,流速1.0ml/min,进样量为10ul。紫外检测器,波长360nm,仅供参考,需要结合实际情况确定参数。



标准曲线:将标准品溶解,定容。并用适当的溶剂进行稀释,成倍数的梯度稀释,至少6个浓度点。根据上述的色谱条件,上机测定色谱峰,对峰面积积分。以峰面积为纵坐标,对应的标准溶液的浓度为横坐标,绘制标准曲线,确保相关系数r2>0.999.得到回归方程,需要计算回收率。方法学上的参数,根据实际情况确定。



结果计算:样品的测定,和标准品相似。对测定的出来的峰,需要准确判断出来。根据峰面积和标准曲线,可以计算出异鼠李素的含量。


2.LC-MS


原理:通过液相色谱将样品中的异鼠李素分离出来,然后用电喷雾离子源(ESI)将分离后的样品离子化,并通过质谱分析进行定量分析。



提取和分离的过程和HPLC类似,不同的是需要对质谱图进行解析。根据标准曲线,进行定量分析。这种方法对于复杂样品中的异鼠李素检测具有优势,同时可以提供分子量和结构信息。


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