一般采用HPLC的方法测定甘草酸含量，有标准品。

1.色谱条件

根据样品和目标化合物的性质，选择适当的色谱柱，将化合物分离出来，在流动相的冲洗作用下，到达检测器测定其峰值。因此，这个过程每个环节都会影响到最终的检测结果。通常情况下，是有标准的方法推荐，去验证和优化即可，也有的是需要自己开发的。比如，采用C18的色谱柱，柱温25℃，每个参数都是有依据的，不能凭空的。紫外检测器，波长250nm，化合物有强烈的特征吸收峰。

流动相可简单，也可以复杂，看具体的情况。甲醇+醋酸铵溶液+乙酸也可以参考一下，如果流动相选的不好，对出峰效果是影响比较大的。一般选择1.0ml/min的流速，每个参数的改变，对其他因素都会有影响，可谓牵一发而动全身，可见方法开发是不容易的事情。进样量10ul，可以手动也可以自动，如果进样量影响出峰，也可以进行必要的调整。

2.样品处理

就科研来说，有从中药材甘草中直接提取的。但很多情况下，是多种药材混合，从而指定测其中甘草酸的含量。

3.标准曲线

标准曲线，就是采用标准品梯度稀释的方式，至少6个浓度点。在上述的色谱条件下，上机测定对应的色谱峰。确保出峰的效果正常，根据色谱峰面积和对应浓度点的关系，可以绘制标准曲线，计算回归方程。计算回收率，确保相关系数r2＞0.999，稳定性符合要求。检测限和定量限，也应有所计算。

4.计算结果

有了标准曲线的回归方程，样品的色谱峰面积，根据公式是可以计算出浓度的。其实，这里面还需要考虑样品的稀释倍数，回收率。