活性氧（ROS）是植物体内与氧代谢相关的过氧化物总称，在细胞信号传导和体内平衡中起重要作用。环境压力如干旱、寒冷、高盐等会促使ROS增加。检测ROS水平常用酶联免疫吸附（ELISA）法，通过双抗体夹心法测定。实验步骤包括抗体包被、ROS加入、酶标抗体结合、洗涤、底物显色及吸光度测定，最终通过标准曲线计算ROS浓度。操作需注意温育、洗涤和显色等步骤的参数调整。
活性氧是植物体内与氧代谢相关的过氧化物的总称，含有自由基或易形成自由基，包括过氧化物、超氧化物、羟基自由基、单线态氧和α-氧等。简称ROS，它是氧代谢的副产物，在细胞信号传导和体内平衡方面具有重要的作用。当环境发生干旱、寒冷、高盐、营养缺乏、金属污染、电离辐射的时候，ROS会增加。常用的检测方法有酶联免疫吸附（ELISA）法，仅供参考。
ELISA采用的是经典的双抗体夹心法，可以测定植物活性氧（ROS）的水平。用纯化的植物ROS捕获抗体包被微孔板，制成固相抗体，往包被的微孔中依次加入ROS，再加入HRP标记的检测抗体结合，形成抗体-抗原-酶标抗体复合物。经过洗涤后，加入底物TMB显色。TMB在HRP酶的催化作用下转化为蓝色，并在酸的作用下变成最终的黄色。颜色的深浅和植物样品中的ROS呈正相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度（OD值），通过标准曲线计算样品中植物活性氧（ROS）含量。
以标准物的浓度为横坐标，OD值为纵坐标，在坐标纸上绘出标准曲线，根据样品的OD值由标准曲线查出相应的浓度；再乘以稀释倍数；或用标准物的浓度与OD值计算出标准曲线的直线回归方程式，将样品的OD值 代入方程式，计算出样品浓度，再乘以稀释倍数，即为样品的实际浓度。
操作步骤参考相关使用说明书，需要注意的是变动的参数。比如37℃温育60min，洗涤的时候，每孔加满洗涤液，静置30s后弃去；显色的时候，要37℃避光显色15min。加入终止液15min内，测定吸光度值。
