异柠檬酸是柠檬酸的异构体，虽然量少，但广泛存在于生物界。柠檬酸在乌头酸酶的作用下可逆地生成异柠檬酸和顺乌头酸。在异柠檬酸脱氢酶的作用下变成α-酮戊二酸，在异柠檬酸裂合酶的作用下变成琥珀酸与乙醛酸。异柠檬酸是一种有机酸，分子式为C6H8O7，在水中能够溶解。异柠檬酸能够增加食品的酸味，提高口感。另外，在医药和化妆品领域，具有重要的用途。

检测样本中的异柠檬酸含量，主要方法有高效液相色谱法（HPLC） 。

在色谱条件方面，选择适当的色谱柱和流动相是非常关键的。一般采用常规的C18色谱柱，柱温30℃，流动相通常为0.6%磷酸水溶液，流速为1.0ml/min，紫外检测器，波长209nm；进样量5-10uL。根据实际情况来调整参数，将色谱峰达到最佳的分离效果，从而有利于数据分析和结果计算。

使用异柠檬酸的标准品，配置成不同浓度的标准溶液，梯度稀释6个点。在上述的色谱条件下，进样检测出色谱峰图和数据。以色谱峰面积为纵坐标，对应标准溶液浓度为横坐标，绘制标准曲线，计算回归方程，确保有良好的线性关系。同时，要计算出回收率，确保测定结果的准确性。

样品处理，如果是固体样品，需要进行粉碎，提取。在低温高速离心机中，离心10min，取上清液，并在0.45um的微孔滤膜中过滤。必要的时候，进行一定倍数的稀释，并记录稀释倍数。上机测试，待基线稳定后，将样品进样。在软件中记录色谱峰和数据。根据异柠檬酸的色谱峰面积，以及回归方程，可以计算出样品中的异柠檬酸含量，考虑稀释倍数和回收率。