铁离子还原能力(FRAP)检测通过亚铁离子与三吡啶基三嗪(TPTZ)在酸性条件下反应生成蓝紫色复合物,测定其在593nm波长下的吸光度。标准品梯度稀释后绘制标准曲线,计算回归方程。样品经处理后测定吸光度,结合标准曲线计算铁离子还原能力。此外,普鲁士蓝生成量也可作为指标,抗氧化剂还原铁氰化钾生成普鲁士蓝,其在700nm处有最大吸收峰,吸光度值越大,样品还原能力越强。
铁离子还原能力(FRAP)检测的基本原理,在酸性条件下,亚铁离子和三吡啶基三嗪(TPTZ)发生反应,生成蓝紫色复合物。通过测定这些蓝紫色复合物的吸光度,在593nm的波长下,可以测定样品和标准品的吸光度值。将标准品进行梯度稀释6-7个点,以吸光度值为纵坐标,以对应标准品溶液的浓度为横坐标,制作标准曲线,计算回归方程。对样品进行处理,比如提取,离心,过滤等,并进行适当的稀释,以空白试剂为对照,测定吸光度值。结合绘制出来的标准曲线的回归方程,可以计算出样品中的铁离子还原能力。

所用设备和试剂:可见分光光度计、1mL 玻璃比色皿(光径 1cm)、恒温水浴锅、低温离心机、可调式移液器、研钵、蒸馏水、三吡啶基三嗪、FRAP标准液、三吡啶基三嗪(TPTZ)。

还可以利用普鲁士蓝Fe4(Fe(CN)6)生成量为指标,抗氧化剂能够将铁氰化钾还原,再利用亚铁离子生成普鲁士蓝,这个物质在700nm处有最大吸收峰。吸光度值越大,样品还原能力越强。吸光度值越大,样品还原能力越强。根据标准曲线的方法,可以计算出样品的铁离子还原能力。