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植物维生素检测方法
来源: | 作者:上海优选生物 | 发布时间: 2024-10-08 | 221 次浏览 | 分享到:
维生素是人和动物维持生命活动所需的微量有机物质,主要通过食物获取,调节代谢功能。维生素种类繁多,包括脂溶性(A, D, E, K)和水溶性(C, B群, PP, 叶酸, 生物素)。它们促进生长、增强抵抗力、健全组织功能、促进食欲、维持健康和保持精力。高效液相色谱(HPLC)、酸碱滴定法、分光光度法和气相色谱法是常见的维生素测定方法。LC-MS/MS串联质谱法是一种先进的检测方法,通过离子化维生素分子测定其含量。滴定法和高效液相色谱法分别用于测定维生素C和多种维生素的含量,需制作标准曲线并计算回归方程和回收率。

维生素是人和动物维持生命活动所需要的一类微量有机物质,它是从食物中获取的,能调节人和动物的代谢功能。维生素的种类有很多,比如维生素A,维生素B1,维生素B2,维生素PP,维生素B5,B6,B9,B12,维生素C、D、E、K等。每种维生素对应的功能是不同的,还可以分为脂溶性维生素:维生素A,D,E,K;水溶性维生素:维生素C,维生素B群,PP,叶酸,生物素。维生素能够促进生长繁殖,加强抵抗力,健全组织功能,促进食欲,维持健康,保持精力旺盛等。



检测植物样本中的维生素含量,高效液相色谱(HPLC)适合大多数维生素的测定,且在某些条件下可以同时分析几种维生素。酸碱滴定法、分光光度法也是测定维生素的常见方法。气相色谱法是一种高效、灵敏的测定方法,比较适合维生素E的测定。通过色谱峰面积,绘制标准曲线,结合样品测定峰面积,可以计算出样品中的维生素E含量。LC-MS/MS串联质谱法是一种先进的维生素检测方法,可以将维生素分子进行离子化,通过质荷比测定其含量。


1.滴定法


先制作淀粉指示剂,用可溶性淀粉0.5g加水5ml摇匀,缓缓加入100ml的沸水,搅拌中再煮沸2min,放冷后取上清液。检测过程:取样品0.2g,用100ml的煮沸过的冷水和10ml的冰醋酸,加淀粉指示剂1mL。立即用0.1mol/L的碘标准溶液滴定,出现蓝色30s内不褪色。这种方法,可以测维生素C的含量。



2.高效液相色谱法


在hplc测定维生素含量的过程中,采用常规的、出色的C18色谱柱,柱温30℃。以甲醇和水为流动相,梯度洗脱,流速为1.5ml/min。紫外检测器,波长根据维生素的种类选择最佳的吸收波长。比如,维生素A采用325nm。进样量可以选择20uL。



根据要提取的维生素的特性,对样品进行适当的提取、净化处理,获得相对干净的维生素溶液。同时,测定维生素也是需要有标准曲线的。选择对应种类的标准维生素,梯度稀释至少6个点,在上述的色谱条件下,进样测定对应的色谱峰。以色谱峰面积为纵坐标,以对应标准溶液浓度为横坐标,绘制标准曲线,计算回归方程和回收率。同时,对测定的样品色谱峰数据进行处理,结合回归方程,计算出样品中的维生素含量。


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