草酸是最简单的有机二元酸，化学式为H2C2O4，是生物体的一种代谢产物。在植物、动物和真菌体中都有发现，在植物的苋菜、甜菜、马齿苋、甘薯等含量较高。草酸的别名是乙二酸，分子量为90.0349.溶于水、乙醇，不溶于苯、氯仿。草酸根具有较强的配合作用，是植物源食品中的另一类金属螯合剂。当草酸和一些碱性土金属元素结合时，溶解性降低。草酸是一种中强酸。其一级电离常数Ka1=5.9×10-2 ，二级电离常数Ka2=6.4×10-5。具有酸的通性。能与碱发生中和，能使指示剂变色，能与碳酸根作用放出二氧化碳。

检测样本中草酸的含量，方法有多种，常见的是酸碱滴定法、高效液相色谱（HPLC）法。

1.酸碱滴定

配制NaOH标准溶液0.1mol/L：以邻苯二甲酸氢钾为基准试剂，用酚酞作指示剂，通过滴定邻苯二甲酸氢钾溶液来标定NaOH标准溶液的浓度。

称取0.5g的草酸样本，放在烧杯中，加入适量的蒸馏水溶解。将溶解后的草酸溶液转移到容量瓶中，用蒸馏水定容，摇匀。吸取20ml的溶液到锥形瓶中，加入1-2滴酚酞试剂，用NaOH标准溶液滴定到微红色，而且板30s内不褪色，记录消耗的NaOH溶液的体积。

根据滴定消耗的NaOH标准溶液的体积和浓度，以及草酸和NaOH的反应比例，可以计算出样品中的草酸含量。

2.高效液相色谱（HPLC）法

色谱条件：C18的反相色谱柱（4.6mmx250mm，5um），柱温30℃。以磷酸二氢钾和甲醇-醋酸铵水溶液为流动相，梯度洗脱，流速为1ml/min。紫外检测器，波长为220nm，进样量20uL。根据实际情况，来调整以上的色谱条件，以达到最佳的检测效果和色谱峰图。

称取新鲜的植物样本，使用0.5mol/L的HCL和石英砂磨成匀浆，倒入试管中，在沸水浴中加热15-20min。冷却后，加入适量的蒸馏水补充。最后，进行过滤，定容，备用。

对标准品进行梯度稀释至少6个点，以上述的色谱条件，上机测定，记录色谱数据和峰图。以浓度为横坐标，以色谱峰面积为纵坐标，绘制标准曲线，并得到回归方程，计算回收率。

以同样的色谱条件，测定样品，记录色谱峰和数据。看峰面积值是否在标准曲线范围内，如果超过了范围，要进行适当的稀释，重新测定。根据结果和回归方程，可以计算出样品中的草酸含量。