大豆异黄酮是大豆生长过程中形成的次级代谢产物，属于黄酮类化合物，具有植物雌激素的结构。它影响植物激素分泌、代谢生物学活性、蛋白质合成和生长因子活性，主要来源于大豆的种皮、胚轴和子叶。大豆异黄酮分为游离型苷元和结合型糖苷两种。检测其含量的方法包括紫外分光光度法、高效液相色谱（HPLC）法、液相质谱联用（LC-MS）法、气相色谱（GC）法、毛细管电泳法和酶联免疫吸附（ELISA）法。HPLC法通过C18色谱柱和梯度洗脱测定色谱峰，计算大豆异黄酮含量；ELISA法采用双抗夹心法，通过酶标仪测定吸光度，计算含量。紫外分光光度法用于测定总大豆异黄酮含量。
大豆异黄酮是大豆生长过程中形成的一类次级代谢产物，属于黄酮类化合物，与植物雌激素具有相似的结构。大豆异黄酮能够影响到植物激素分泌、代谢生物学活性、蛋白质合成以及生长因子活性。主要来源于豆科植物大豆的种皮、胚轴和子叶中，天然的大豆异黄酮主要分为游离型的苷元和结合型的糖苷两种。
检测样本中大豆异黄酮的含量，常见的方法有紫外分光光度法、高效液相色谱（HPLC）法、液相质谱联用（LC-MS）法、气相色谱（GC）法、毛细管电泳法、酶联免疫吸附（ELISA）法等，这里简单的介绍两种。
1.高效液相色谱（HPLC）法
色谱条件：C18色谱柱，柱温25℃；甲醇：0.3%磷酸为流动相，梯度洗脱，流速1.0ml/min；进样量20ul；紫外检测器，波长260nm。
样品准备：称取固体的样品若干克，粉碎，在55℃真空干燥24h，进一步粉碎。称取0.2g样品粉末，加入5ml正己烷，超声波脱脂10min，3000r/min离心3min。去除正己烷，加入10ml的80%的甲醇，超声萃取10min，3000r/min离心3min，转移上清液，在70℃水浴中挥发干，再用80%甲醇溶解到400ul，过滤，待测。
标准曲线制作：称取大豆异黄酮标准品5mg，置于10ml容量瓶中，用80%甲醇溶解，定容，摇匀，配制成0.5mg/ml的标准溶液。梯度稀释7个点，并在上述的条件下，在HPLC中测定对应的色谱峰。以标准浓度为横坐标，对应色谱峰面积为纵坐标，制作标准曲线，计算回归方程和回收率。同时测定样品中的大豆异黄酮的色谱峰，根据色谱峰面积，可以计算出样品中的大豆异黄酮含量。
2.酶联免疫吸附（ELISA）法
检测方法： 双抗夹心法。
检测原理：用纯化的抗原包被微孔板，制成固相抗原,往包被的微孔中依次加入大豆异黄酮(CRG)，再与 HRP 标记的抗原结合，形成抗原-抗体-酶标抗原复合物，经过洗涤后加底物TMB 显色。TMB 在 HRP 酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样品中的大豆异黄酮(CRG)呈正相关。用酶标仪在 450nm 波长下测定吸光度(OD 值)，通过标准曲线计算样品中大豆异黄酮(CRG)含量。
这种方法适合大量样品样品的检测，精度要略低于HPLC和LC-MS。
此外，大豆异黄酮结构中羟基和芳环形成的共轭体系对紫外光有特征吸收，用紫外分光光度法测定总大豆异黄酮含量。
