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高效液相色谱测果糖含量
来源: | 作者:上海优选生物 | 发布时间: 2024-09-13 | 233 次浏览 | 分享到:
果糖是一种单糖,分子较小且渗透压高,具有良好的防腐性能。其分子式为C6H12O6,具有醇和酮的化学性质,天然形式为游离D-果糖。检测果糖含量的方法包括高效液相色谱(HPLC)法,使用高效液相色谱仪、示差折光检测器或蒸发光散射检测器等设备,以及果糖标准品、色谱纯乙腈等试剂。通过梯度稀释标准品并绘制标准曲线,可以计算样品中的果糖含量。

果糖是单糖,分子比蔗糖小,渗透压比蔗糖高1倍,能较快地穿透细胞组织。防腐性能好,有利于抑制食品微生物生长。果糖的分子式为C6H12O6,是多羟基酮糖,具有醇、酮的化学性质。分子量为180.155,天然的果糖以游离D-果糖形成存在,在自然条件下似油状的粘稠液。羟基能与羰基发生亲核加成,可分别形成含有六员环吡喃型、五员环呋喃型的半缩酮。果糖中含6个碳原子,也是一种单糖,是葡萄糖的同分异构体。



检测果糖含量的方法有多种,这里介绍一种高效液相色谱(HPLC)法


所用的设备包括高效液相色谱仪,示差折光检测器或蒸发光散射检测器,氨基色谱柱,移液器,容量瓶等。所需要的试剂包括果糖标准品、色谱纯乙腈、超纯水以及其他样品处理的溶剂等。



色谱条件包括氨基柱、柱温35℃,乙腈-水流动相(梯度洗脱)、流速1.0mL/min,示差折光检测器或蒸发光散射检测器,进样量10uL。根据实际情况,需要自己摸索方法。


精确称取一定量的果糖标准品,梯度稀释成6个不同浓度的标准溶液。在设定的色谱条件下,依次进样测定,记录峰面积。以果糖浓度为横坐标,峰面积为纵坐标,绘制标准曲线,计算回归方程和回收率。采用合适的提取和净化方法,将处理好的样品溶液转移到进样瓶中,在设定的色谱条件下上机测定,记录峰面积。根据标准曲线,计算样品中的果糖含量。


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