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植物钙离子含量测定方法
来源: | 作者:上海优选生物 | 发布时间: 2024-09-12 | 450 次浏览 | 分享到:
钙在植物中扮演多重角色,包括增强细胞壁强度、调节酶活性、作为信号传导的第二信使、调节pH值和细胞内环境稳定等。在低温胁迫下,钙能增强植物的抗寒性。比色法是一种测定植物组织中钙含量的简单方法,通过钙离子与甲基百里香酚蓝结合生成蓝色络合物,再通过比色法计算钙含量。此外,还有原子吸收法等其他测定方法。

钙,是植物细胞壁果胶质的结构成分,能够和果胶酸形成果胶酸钙固定在两个细胞壁之间。当植物收到病菌的侵害时,能够增强抗病力,让细胞壁包裹在一起,不易腐烂。钙,在细胞膜中作为磷酸和蛋白质的羧基间联起着纽带作用。钙,可以和植物细胞中的钙调蛋白结合调节酶的活性,作为激素和环境信号传导的第二信使。钙,在植物新陈代谢过程中生成的有机酸形成草酸钙、柠檬酸钙、苹果酸钙等,调节pH值,稳定细胞内环境等。钙,在低温胁迫下能够减缓超氧化物歧化酶、过氧化物酶的速度,增强抗寒性。钙,调节细胞内离子平衡,减少钠离子的吸收,促进离子的选择性吸收、运输和分配。



这里介绍一种比较简单的测定方法,就是比色法。利用样本中钙离子在碱性溶液中与甲基百里香酚蓝(MTB)结合,生成蓝色络合物;通过比色与同样处理的钙标准进行比较,可计算出样本中钙的含量。这种方法适合于植物组织,包括种子、叶片、根茎等部位。


样品准备:准备新鲜的植物组织,称量200mg,放入15ml的离心管中,加入3ml清理液。切碎组织,放入预冷的15ml离心管,加入1ml裂解液,旋涡振荡5s,充分混匀。移入1.5ml的离心管中,放到4℃离心10min,转速7500RPM。取出上清液,放到新的离心管中,重复离心5min,7500RPM,备用。



加入反应试剂和显色剂,室温下孵育5分钟,生成蓝色络合物(如果有试剂盒,可以按说明书操作步骤完成)。在610nm的地方有最大吸收峰,通过钙离子标准品梯度稀释,以空白为对照,测定对应的吸光度值,绘制标准曲线,计算回归方程。同时,测定的样品的吸光度值,根据回归方程,计算出样本中的钙离子浓度。


除了比色法,还有原子吸收法等,仅供参考。


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