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草酸根的测定方法
来源: | 作者:上海优选生物 | 发布时间: 2024-09-11 | 620 次浏览 | 分享到:
草酸根离子(C2O42-)是生物体的一种代谢产物,广泛分布于植物、动物和真菌中。它具有双齿配体特性,能与中心离子形成配位键,并具有生物活性。草酸根的测定方法包括高锰酸钾滴定法、分光光度法、高效液相色谱法和离子色谱法。高锰酸钾滴定法通过观察溶液颜色变化确定滴定终点,需控制酸度和温度。分光光度法利用草酸根与磺基水杨酸铁络合物的颜色变化测定吸光度。高效液相色谱法通过标准曲线计算草酸根含量,需注意色谱条件和样品处理。

草酸根离子,也称为草酸二负离子,化学式为C2O42-。它是生物体的一种代谢产物,二元弱酸,广泛分布于植物、动物和真菌等。经过研究发现,菠菜、苋菜、甜菜、甘薯等植物中都含有丰富的草酸。草酸根是双齿配体,具有两个配原子,分别是两个端口氧原子,它能够与中心离子形成两个配位键。二价还原性阴离子可以被氧化,也可以和很多金属离子形成配合物。草酸根还具有一定的生物活性,对于一些生物过程有调节作用。



草酸根的测定方法有多种,包括高锰酸钾滴定法、分光光度法、高效液相色谱(HPLC)法和离子色谱法等。


1.高锰酸钾滴定法


在滴定过程中,当所有的草酸分子都被氧化成二氧化碳和水,溶液中的草酸被消耗时,高锰酸钾的紫色溶液会变为无色。当溶液由无色突变为粉红色,且半分钟内颜色不褪去,即可认为是滴定终点。滴定的过程中要注意,刚开始的时候溶液的酸度在0.5-1mol/L,酸度过高会导致草酸分解。溶液的反应温度应在75-85℃滴定,若高于90℃,会使部分草酸分解;温度也不能太低,太低反应速度缓慢。



2.分光光度法


根据草酸根和磺基水杨酸铁络合物反应,导致的颜色变化,反应稳定后,使用分光光度计在特定波长处测吸光度值。利用标准曲线,可以计算出样本中的草酸根含量。



3.高效液相色谱(HPLC)法


色谱条件仅供参考,实际情况要自己摸方法,比如采用C18色谱柱,柱温25℃;甲醇-0.2%磷酸二氢铵溶液,流速0.5-1mL/min;紫外检测器,检测波长197nm。使用标准品,梯度稀释6个点,以HPLC参考色谱条件,上机测定色谱图。记录峰高和峰面积及相关数据,对峰面积进行积分。以标准品对应浓度为横坐标,色谱峰面积为纵坐标,绘制标准曲线,计算回归方程和回收率。对样品进行处理,并稀释到合适的范围内,以同样的条件上机测定色谱峰,记录峰面积。结合标准曲线,可以计算出样本中的草酸根含量。


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