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维生素E测定方法
来源: | 作者:上海优选生物 | 发布时间: 2024-09-06 | 699 次浏览 | 分享到:
维生素E,又称生育酚,是一种脂溶性维生素,具有抗氧化能力。它溶于脂肪和乙醇,不溶于水,对热和酸稳定,但对碱不稳定,在油炸和光照条件下活性降低。维生素E广泛应用于医药、食品、饲料和化妆品等行业,主要来源于植物油、谷类、坚果、肉、奶、蛋等食物。检测维生素E含量的方法包括比色法、高效液相色谱法和气相色谱法。比色法利用维生素E的酚羟基氧化生成棕红色物质,或与特定试剂反应生成紫色产物进行测定。高效液相色谱法通过C18色谱柱和紫外检测器,结合标准曲线法,测定样品中维生素E的含量。

维生素E,简称为VE,又名生育酚。它是人体必需的一种脂溶性维生素,具有良好的抗氧化能力。溶于脂肪和乙醇等有机溶剂,不溶于水,对热、酸稳定、对碱不稳定。油炸的时候,VE活性明显降低。在光照的条件下,遇到空气易被氧化呈暗红色。它被广泛的应用在医药、食品、饲料和化妆品等行业。VE主要来源于各种油料种籽及植物油中,谷类、坚果、肉、奶、蛋等。在常见水果比如火龙果、橘子、猕猴桃、覆盆子,粮食如花生、大豆、芝麻等也含有。



检测样本中VE含量方法有比色法、高效液相色谱(HPLC)法、气相色谱(GC)法等,科研检测,仅供参考。


1.比色法


VE结构中含有游离的酚羟基,可被强氧化剂氧化,生成棕红色物质。在一定浓度范围内,其吸收值与生育酚含量成正比,可用间接比色法测定维生素E的含量。也可以和2,2-二联苯酚在酸性条件下发生反应,生成紫色的产物,在特定的波长下测定吸光度值,结合标准曲线,计算出样本中的VE含量。还可以使用VE和高价铁离子发生反应生成亚铁离子,利用亚铁离子和α,α-联氮苯发生颜色反应,可以测定VE的含量。



2.高效液相色谱(HPLC)法


色谱条件的设置:采用C18色谱柱,柱温25℃、以甲醇-水为流动相,紫外检测器,波长285nm,流速1.0ml/min,进样量10ul,根据实际情况调整参数。



样品处理采用研磨-称量-水浴溶解-定容-过滤的方法,由于对光敏感,需要使用棕色的容量瓶。


采用六点标准曲线法,精确称量VE标准品,甲醇梯度稀释,呈6个不同浓度的标准品溶液。在上述的色谱条件下,上机测定对应浓度的色谱峰,记录数据。以色谱峰的峰面积为纵坐标,以对应浓度为横坐标,制作标准曲线,计算回归方法和回收率。对样品也进行测定,通过色谱峰面积的对比,如果超过了标准曲线范围,可以进行适当的稀释。根据标准曲线,计算出样本中的VE含量。


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