超氧化物歧化酶，简称SOD，是生物体内存在的一种抗氧化金属酶。它能够催化超氧阴离子自由基歧化生成氧和过氧化氢，在机体氧化和抗氧化平衡中起着重要作用。SOD的催化作用，是通过金属离子M的氧化态和还原态的交替电子得失而实现的。SOD广泛分布在微生物、植物和动物体内，在蔬菜水果中含量较高，如香蕉、山楂、刺梨、猕猴桃、大蒜等。SOD是一种金属酶，含有铜和锌两种离子，能够清除有害的氧自由基，提高免疫力。

一般是从植物中提取而来，检测方法有多种，比如氮蓝四唑（NBT）法、邻苯三酚自氧化法、细胞色素C还原法、化学发光法及荧光动力学法等。这里举两个例子，仅供参考。

1.氮蓝四唑（NBT）法

检测原理：核黄素受光激发，与电子供体反应被还原。在氧气中，还原的核黄素与氧化反应产生，将无色（或微黄）的氮蓝四唑还原为蓝色的甲腙。那么，SOD可以清除O2，减少了氧的存在，就降低了蓝色甲腙的形成。因此，当SOD酶活很强的时候，氧就下降很快，产生的蓝色物质就少，测吸光度的时候数值就较低。当SOD酶活低的时候，就有较多的氧存在，从而促进氮蓝四唑更多的还原为蓝色的甲腙。在分光光度计560nm波长处，具有最大吸收值。测定吸光度值，通过标准曲线，计算出样本中的SOD活性。

具体步骤包括SOD酶液的提取、显色反应等，即将植物叶片研磨后离心得到SOD粗提液，显色反应色通过NBT等试剂完成。材料和试剂包括磷酸缓冲液、甲硫氨酸（Met）溶液、氮蓝四唑（NBT）溶液、EDTA-Na2溶液、核黄素溶液等。

要测定的是SOD的活性，因此，需要有标准品进行至少6个点的梯度稀释，并参与反应，从而获得对应的吸光度值。根据已知标准溶液的浓度和对应吸光度值的关系，制作标准曲线，并根据测定样本中的吸光度值，计算出SOD的活性。如果这个浓度超过了标准曲线范围，需要对样本提取液进行适当的稀释，从而获得相对准确的计算结果。

2.邻苯三酚自氧化法

基本原理是基于经典的分光光度法，在碱性条件下，邻苯三酚自氧化成红桔酚，同时产生O2。用紫外-可见分光光度计的波长为420nm，可以测定产生的有色物质。SOD催化O2发生歧化反应从而抑制邻苯三酚的自氧化，样品对邻苯三酚自氧化的抑制，可计算出植物样本中的SOD活性。

这种方法也是依据SOD对氧的抑制，通过有色反应来间接的体现SOD的作用。测定SOD对照品梯度稀释后，参与反应后的吸光度值，制作标准曲线。对样本中的提取液，参与反应，测定吸光度值，结合标准曲线，计算出样本中的SOD活性。同时，也要注意测定的浓度是否在标准曲线的范围内。