芦丁，又称芸香苷，是一种天然黄酮苷，具有抗氧化和抗炎作用，主要存在于橙皮、芸香叶等植物中。测定植物叶片中芦丁含量的方法包括高效液相色谱（HPLC）法和比色法。HPLC法通过提取植物样本，使用C18色谱柱和紫外检测器，测定芦丁含量。比色法则通过与特定试剂反应生成显色化合物，利用分光光度计测定吸光度，从而计算芦丁含量。这两种方法均需制作标准曲线，以确保测定结果的准确性。
芦丁，又称为芸香苷、维生素P，分子式为C27H30O6。它是一种天然的黄酮苷，能溶解于吡啶、甲酰，不溶于氯仿。根据药理学研究，芦丁具有抗氧化、抗炎的作用。芦丁主要存在于橙皮、芸香叶、番茄等体内，在荞麦花和槐花米内含量尤其丰富。
植物叶片中芦丁含量的测定方法，主要包括高效液相色谱（HPLC）法和比色法。
1.高效液相色谱（HPLC）法
样品提取：称取1.0g的植物样本，粉碎于100mL离心管中，加入70%的甲醇50mL摇匀。超声提取后，离心10min，上清液用0.45um微孔滤膜过滤。
色谱条件：C18色谱柱（4.6×250mm，5μm），柱温30℃；紫外检测器，检测波长360nm；进样量10uL，甲醇:4％甲酸溶液（40：60），流速:1.0mL/min；外标法定量，在测定范围内，色谱峰面积和浓度有良好的线性关系。
标准品配制：精密称取一定量的芦丁标准品，以70%甲醇逐级稀释，得到浓度为0、5、10、50、100、200μg/mL的标准工作溶液。在HPLC上以上述条件进行测定，记录色谱峰数据。以色谱峰面积以为纵坐标，以浓度为横坐标，制作标准曲线，并计算回归方程，同时计算回收率。待测液中芦丁的响应值应在标准曲线范围内，超过线性范围则应稀释后再进样测定。根据标准曲线和样品的色谱峰面积，计算出样品中的芦丁含量。
2.比色法
芦丁是一种黄酮类化合物，具有较强的紫外吸收能力，在和特定试剂发生反应的时候，会形成显色的化合物，通过测定显色的吸光度值，制作标准曲线，并以此来计算芦丁的含量。
将提取出来的芦丁样品溶液，加入硼酸-硝普酰胺充分混合，反应生成蓝色的化合物，在分光光度计波长为500nm测定吸光度值。将芦丁标准品，梯度稀释，制作成6个不同浓度的标准工作液，分别加入显色剂，测定吸光度值。以吸光度值为纵坐标，以浓度为横坐标，制作标准曲线。同时，测定的样品的吸光度值，如果计算结果超过了标准曲线范围，需要对样品进行稀释，重新测定，可以多测几次求取平均值。
