5-羟基色胺是一种吲哚衍生物，又称血清素，简称5-HT，化学式为C10H12N2O，分子量为176.22。来源于色氨酸，是一种在人体中广泛分布的神经递质，对生理功能有重要影响。色氨酸在体内的转化，需要维生素C、叶酸、铁、钙和维生素6的帮助，最终生成5-羟基色胺。5-羟基色胺的代谢过程有两个，一个是甲基化途径，即5-羟基色胺通过甲基化的作用转变为5-羟基甲醇，然后被肾脏排出体外。另外一个是氧化途径，在单胺氧化酶的作用下，5-羟基色胺被氧化成5-羟吲哚乙酮，被肝脏排出体外。

检测样本中的5-羟基色胺含量，主要方法有气相色谱（GC）法、高效液相色谱（HPLC）法、液相质谱联用（LC-MS）法、酶联免疫吸附（ELISA）法等。

1.气相色谱（GC）法

样本准备：将动物组织进行匀浆处理，通过酰化反应，将5-羟基色胺转化为易于气相分析的形式，经过乙酸乙酯提取，并实现衍生化。

色谱条件：采用石英毛细管柱为色谱柱，以氦气为载气，设置柱温上升速率，进口温度和接口温度。

通过检测程序，将样品中的5-羟基色胺分离并检测出来。

2.高效液相色谱（HPLC）法

色谱条件：采用C18的色谱柱，柱温25℃，紫外检测器，波长275nm，流动相为甲醇-水-乙酸（70:30:0.1V/V），流速1mL/min，进样量20uL。

具有高灵敏度、高特异性、干扰因素少等特点，可以同时检测5-羟基色胺及相关物质。同时，为了更精准的测定，可以搭配质谱仪。

3.酶联免疫吸附（ELISA）法

这种方法一般是采用试剂盒，以双抗体夹心法测定样本中的5-羟基色胺含量。用纯化的5羟色胺（5-HT）捕获抗体包被微孔板，制成固相抗体，往包被的微孔中依次加入5羟色胺（5-HT），再和HRP标记的检测抗体结合，形成抗体-抗原-酶标抗体复合物，经过彻底洗涤后加底物TMB显色。TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样品中的5羟色胺（5-HT）呈正相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度（OD值），通过标准曲线计算样品中5羟色胺（5-HT）含量。